華蟾素對(duì)耐阿霉素人乳腺癌細(xì)胞多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)及機(jī)制初探.pdf

1、測(cè)定中藥華蟾素注射劑(cinobufacine Injection，Cino)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株(MCF-7／ADM)的無細(xì)胞毒性濃度，并檢測(cè)此劑量能否逆轉(zhuǎn)MCF-7／ADM株細(xì)胞對(duì)化療藥物阿霉素(adriamycin，ADM)的耐藥性及其可能的機(jī)制。 方法: 體外培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞阿霉素敏感株(MCF-7／S)和阿霉素耐藥株(MCF-7／ADM)，先采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)Cino對(duì)MCF-7／s,nM

2、CF-7／ADM兩株細(xì)胞有無細(xì)胞毒性作用并確定其無細(xì)胞毒性濃度；MCF-7／ADM株細(xì)胞對(duì)ADM的耐藥倍數(shù)：無細(xì)胞毒濃度的Cino對(duì)MCF-7／ADM株細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)倍數(shù)及其對(duì)MCF-7／ADM株細(xì)胞生長曲線及倍增時(shí)間的影響。再用高效液相色譜(HPLC)法檢測(cè)加無細(xì)胞毒濃度Cino前后MCF-7／S和MCF-7／ADM兩株細(xì)胞內(nèi)阿霉素(ADM)的濃度變化。 結(jié)果: 1.MTT比色法結(jié)果顯示：Cino可明顯抑制體外培養(yǎng)的MCF

3、-7／s株和HMCF-7／ADM株細(xì)胞的增殖，且抑制程度隨Cino作用時(shí)間和濃度的增加而增加。表明Cino本身有細(xì)胞毒性作用，能抑制MCF-7兩株細(xì)胞的增殖，MCF-7／ADM細(xì)胞對(duì)Cino仍然敏感；低于15μg／ml的Cino對(duì)MCF-7／s和MCF-7／ADM兩株細(xì)胞均無顯著毒性作用(IR<10％)，該濃度的Cino與ADM合用時(shí)，能顯著降A(chǔ)DM對(duì)MCF-7／ADM細(xì)胞的IC<,50>強(qiáng)ADM對(duì)MCF-7／ADM株細(xì)胞的殺傷作用，即

4、與ADM合用時(shí)，能恢復(fù)ADM對(duì)MCF-7／ADM細(xì)胞的增殖抑制作用，ADM與Cino協(xié)同作用合用的CI值小于1，表明Cino具有化療增敏作用，與細(xì)胞計(jì)數(shù)繪制生長曲線結(jié)果相一致。2.高效液相色譜法結(jié)果顯示：無細(xì)胞毒濃度(15μg／ml)Cino與5μg／mlADM合用后，能顯著增加MCF-7／ADM株細(xì)胞內(nèi)ADM的積累，而未見顯著增加MCF-7／S株細(xì)胞內(nèi)ADM的積累，表明Cino可能通過某種機(jī)制而減少藥物的外排。 結(jié)論:

5、 1.MCF-7／s株和MCF-7／ADM株兩細(xì)胞的生長抑制率均明顯隨Cino濃度及作用時(shí)間的增加而增加，呈藥物濃度一時(shí)間依賴方式。表明Cin0本身對(duì)MCF-7兩株細(xì)胞有增殖抑制作用，MCF-7／ADM株細(xì)胞對(duì)Cino未產(chǎn)生耐藥性。 2.無細(xì)胞毒濃度的Cino能明顯增強(qiáng)ADM對(duì)人乳腺癌細(xì)胞耐藥株MCF-7／ADM的化療增敏作用，表明Cino對(duì)MCF-7／ADM細(xì)胞的MDR有部分逆轉(zhuǎn)作用。 3.無細(xì)胞毒濃度的Cino能明顯