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1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文三個miniSTR基因座熒光標記復(fù)合擴增體系的建立及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究姓名:蔣師申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):法醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:侯一平20070420叫J11人學(xué)碩f:論文中文摘要三個miniSTR基因座熒光標記復(fù)合擴增體系的建立及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究研究生:蔣師導(dǎo)師:侯一平教授四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院成都(610041)目的本課題旨在建立新的miniSTR熒光標記復(fù)合擴增體系,并按照美國DNA分析方法技術(shù)工作組(TWGDA
2、M)的指導(dǎo)方案,進行法醫(yī)學(xué)應(yīng)用性研究。方法從已有國內(nèi)頻率資料的STR基因座中篩選出可用于設(shè)計MiniSTR引物的基因座,進行引物設(shè)計;用未標記的新引物在銀染顯色方法下進行復(fù)合擴增實驗,選出復(fù)合成功基因座定購熒光標記引物;制作等位基因分型標準物;采用美國ABl310遺傳分析儀進行熒光標記引物復(fù)合擴增試驗,并優(yōu)化擴增條件,對不同退火溫度下復(fù)合擴增的效果進行研究;對復(fù)合擴增系統(tǒng)的靈敏度、基因座的種屬特異性、案例應(yīng)用、降解模型、陳舊樣本等法醫(yī)學(xué)
3、應(yīng)用進行研究。結(jié)果成功設(shè)計了D19S591,D2S2944,D18S872基因座的小于130bp的miniSTR擴增引物,成功建立了D19S591。D2S2944,D18S872的miniSTR熒光標記復(fù)合擴增體系。這~擴增體系條件易于優(yōu)化,采用國產(chǎn)Taq酶進行擴增,即可得到滿意的擴增產(chǎn)物和分型結(jié)果。相對于國外昂貴的試劑盒,它是一種成本低廉但效率高的STR基因座復(fù)合擴增體系。法醫(yī)學(xué)應(yīng)用性研究表明:三個基因座有較高的種屬特異性;該體系的檢
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