番石榴葉總黃酮對糖尿病小鼠肝臟胰島素信號通路及肝臟葡萄糖異生的調控機制研究.pdf

1、背景：隨著全球經濟的發(fā)展和人們生活方式的改變，整個世界糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)的患病率持續(xù)上升。據(jù)2011年國際DM聯(lián)盟（IDF）最新數(shù)據(jù)，截止2011年全世界DM患病人數(shù)已達3.66億，預計到2030年,全球成人DM患病人數(shù)將增加到5.22億[1]。DM是由多種原因引起的以慢性高血糖為特點的代謝紊亂性疾病，并且伴有因胰島素（Insulin,INS）分泌缺陷引起的糖、脂和蛋白質代謝異常。1型DM以INS分泌絕對

2、不足為主；2型DM以INS抵抗為主，伴INS分泌相對不足；長期持續(xù)的高血糖會導致廣泛的周圍組織和器官損害[2]。繼腫瘤、心血管病之后，DM已成為第三大嚴重威脅人類健康的慢性疾病。目前西醫(yī)臨床主要采用口服降糖藥和INS強化治療的方式來延緩DM發(fā)展，但這些藥物有時還是無法達到預期的治療效果，且存在多種副作用，對損傷的胰島也沒有保護作用。所以尋找一種控制血糖的簡便易行、安全可靠的方法，對DM的預防和治療十分重要。番石榴葉（Psidium gu

3、ajava L）為桃金娘科番石榴屬植物，近年來的研究顯示番石榴葉具有較好的抗DM作用,但其作用機制研究尚不廣泛深入。本文研究番石榴葉總黃酮提取物降血糖作用及其機制，為開發(fā)新的降糖藥物提供參考依據(jù)。目的：研究番石榴葉總黃酮提取物對DM小鼠肝臟葡萄糖代謝、胰島素信號通路相關分子表達、肝臟葡萄糖異生的調控機制及對胰島的保護作用，探索其降糖作用機制。
　　方法：雄性BALB/c小鼠，腹腔注射鏈脲佐菌素（Streptozocin,STZ）6

4、0 mg.kg-1連續(xù)5 d后，血糖儀檢測空腹血糖水平，以連續(xù)3d空腹血糖濃度>11.1mmol.L-1為糖尿病模型成功標準。DM小鼠隨機分為模型組和番石榴葉總黃酮提取物治療組，每組10只，另設10只正常對照小鼠。治療組劑量以相當于生藥16.5g kg-1.d-1番石榴葉總黃酮提取物灌胃，正常組和模型組以等體積蒸餾水灌胃，2周后測其空腹血糖、體重、Elisa測其血清胰島素(INS)水平、病理觀察胰島數(shù)目及形態(tài)學改變、免疫組化觀察胰島素分

5、泌量、熒光PCR法檢測肝葡萄糖激酶（glucokinase， GK）、葡萄糖激酶調節(jié)蛋白（glucokinase regulatory protein,GKRP）、葡萄糖轉運蛋白-2（glucose transporter2，GLUT-2）、胰島素生長因子-1(insulin growth factor-1,IGF-1)、胰島素受體底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)、胰島素受體底物-2(in

6、sulin receptor substrate-2,IRS-2)和糖異生酶葡萄糖-6-磷酸酶（glucose-6-phosphatase， G-6-pase)與磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（phosphoenolpyruvate carboxykinase，PEPCK)表達；Western blot測肝臟葡萄糖轉運蛋白-2（glucose transporter2，GLUT2）的表達。
　　結果：與正常組比，模型組小鼠體重明顯降低（P

7、<0.01），血糖明顯升高（P<0.01）；胰島周圍胰島素（INS）分泌量和血清胰島素(INS)分泌量均明顯下降；胰島變性明顯，胰島數(shù)目明顯減少、體積變小、甚至消失；肝GK，GLUT2， IGF-1，IRS-1和IRS-2表達下降，GKRP，G-6-pase和PEPCK表達升高，Western blot顯示肝GLUT2表達降低。與模型組比，番石榴葉總黃酮治療組血糖明顯降低（P<0.05），胰島周圍和血清胰島素(INS)分泌均增多；胰島數(shù)