生防菌淡紫擬青霉多糖的分離、純化及結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、篩選到一株對(duì)枯萎病病原菌.尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)具有拮抗抑制作用的淡紫擬青霉(Peacilomyces ilacinus)菌株NH-PL-03，抗性物質(zhì)初步篩選結(jié)果表明其胞外粗多糖具有抑菌活性。本論文對(duì)該菌株的胞內(nèi)、外多糖進(jìn)行了提取、純化研究，并對(duì)純化所得的兩個(gè)單組分多糖IP-1和EP-1進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析以及抑菌活性測(cè)定。主要研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下： l、通過(guò)形態(tài)學(xué)和rDNA-ITS序列分析，鑒定出分離保存

2、的菌株為淡紫擬青霉。對(duì)其培養(yǎng)特性進(jìn)行了研究。 2、淡紫擬青霉發(fā)酵液的胞內(nèi)、胞外物質(zhì)經(jīng)過(guò)醇析法加乙醇3倍即可得到多糖粗提物。經(jīng)過(guò)測(cè)試反應(yīng)驗(yàn)證，該粗提物為多糖，并具有凝膠多糖的理化特性。進(jìn)一步的分離實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)經(jīng)Sevage法脫蛋白3～5次后，可以使淡紫擬青霉粗多糖中的蛋白質(zhì)含量低于0.62％。脫蛋白后的胞內(nèi)、外粗多糖經(jīng)凝膠柱層析純化后各自得到一個(gè)組成分IP-1和EP-1，紫外光譜檢測(cè)兩者已不含蛋白質(zhì)、核酸等非多糖類物質(zhì)。純化后的淡

3、紫擬青霉多糖同樣具有凝膠多糖的特性。 3、在對(duì)淡紫擬青霉胞內(nèi)、外多糖IP-1和EP-1的分子結(jié)構(gòu)分析中，證明兩者均是以1→3葡萄糖苷鍵連接的單一單糖組分的無(wú)分支結(jié)構(gòu)的多聚葡萄糖；Sephacryl S-200 HR凝膠層析求得IP-1和EP-1樣品的平均分子量分別為24.4KD和35.2KD；剛果紅結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明IP-1和EP-1樣品在稀堿溶液中(濃度<0.3mol/L)存在三股螺旋構(gòu)象。IP-1和EP-1的分子結(jié)構(gòu)為：