鹽地堿蓬SsPrxQ基因和擬南芥AtPrxQ基因的進一步功能研究.pdf

1、；翻黼◆碩士學(xué)位論論文題目學(xué)科專業(yè)名稱申請人姓名導(dǎo)師姓名論文提交時間鹽地堿蓬姍Q基因和擬南翔￡陬Q基因的進一步功能研究發(fā)育生物學(xué)井立文張慧教授2006年4月29日文山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽地堿蓬&肌Q基因和擬南芥彳￡№Q基因的進一步功能研究中文摘要正常的細胞代謝和許多種脅迫都會使需氧有機體產(chǎn)生活性氧，適量的活性氧可以作為信號分子控制和調(diào)節(jié)細胞生長、細胞周期、程序性細胞凋亡、激素信號傳導(dǎo)、生物或非生物的脅迫應(yīng)答以及發(fā)育等生物過程，但過量

2、的活性氧不可避免的對生物大分子如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)以及DNA等造成氧化損傷從而導(dǎo)致細胞受傷或死亡。因此活性氧必須被控制在適當(dāng)?shù)乃揭跃S持正常的細胞代謝。一個有效的抗氧化劑網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)對于維持細胞的功能是很必要的，尤其是在葉綠體和線粒體的新陳代謝中。一些代謝物，如谷胱甘肽、抗壞血酸鹽；一些酶類，如超氧化物歧化酶(sOD)、抗壞血酸過氧化物酶(APx)、谷胱甘肽過氧化物酶都是抗氧化劑代謝中研究的很廣泛很深入的成分。近來，過氧還蛋白(Prxs)被作為一

3、類新的酶類抗氧化劑被鑒定出來，它們依賴硫氧還蛋白等電子供體還原H202、烷基過氧化物和過氧亞硝酸鹽。過氧還蛋白(Prxs)在生物中普遍存在、豐富而且功能多樣。植物中的過氧還蛋白共分為四類：1cysPⅨ、2一cysPn(、T押eIIPrx以及PrxQ。其中PrXQ首先從佛甲草(＆幽塒，f“P口r)中被克隆，與細菌鐵蛋白共遷移蛋白(BcP)同源性很高。目前對植物中其它Prxs基因的分子和生化功能研究進展迅速，對PⅨQ的研究數(shù)據(jù)則較少。本實驗

4、室從400mMNacl處理的鹽地堿蓬葉片cDNA文庫中克隆到過氧還蛋白Q基因(＆脅Q)，并已經(jīng)證明了它是一個脅迫相關(guān)基因，可以提高擬南芥的脅迫耐受能力，chloropl1軟件分析表明N末端有64個氨基酸的葉綠體轉(zhuǎn)運肽。本實驗用YFP熒光融合蛋白進一步分析了ssPrxQ在擬南芥中的亞細胞定位，結(jié)果表明該蛋白定位于葉綠體中，這和用C1110mpl1軟件分析的結(jié)果是一致的。為了更全面了解SsPⅨQ蛋白的功能并和擬南芥AtPr)【Q蛋白做功能比

5、較，本實驗構(gòu)建了4個酵母過量表達載體：p416腦P慣Q，p426函P膩Q，p416叫fP麒Q，p426爿fP研Q。分別用Nacl、Kcl、高溫、低溫、H202等脅迫條件處理并分析了過量表達＆P辮Q或4r脅Q的酵母，結(jié)果表明低拷貝數(shù)的載體(p416)攜帶的彳fmQ基因更有助于提高酵母的耐逆性。另外，本實驗為了利用轉(zhuǎn)錄后基因沉默技術(shù)對擬南芥彳f脅Q基因進行沉默研究，構(gòu)建了該基因的pGsAl252基因沉默表達載體并利用花浸染法進行了擬南芥的基