年輕小鼠海馬攜帶人ApoE4基因?qū)е峦挥|和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)異常的研究.pdf

1、目的：通過觀察年輕（4月齡）的ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠腦片海馬腦片樹突形態(tài)及興奮性突觸后電位變化，探討ApoE4基因?qū)δ贻p小鼠海馬突觸功能和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)活動的影響。
　　方法：雄性4個(gè)月ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠（年輕ApoE4 TG組）22只，體重35g±5g，12個(gè)月ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠20只。雄性4個(gè)月ApoE3轉(zhuǎn)基因小鼠（ApoE3 TG組）22只，分別異氟烷吸入麻醉后，斷頭處死，開顱取腦，取背側(cè)海馬區(qū)冠狀腦片，置于人工腦脊液中孵育至少

2、1小時(shí)后轉(zhuǎn)移到水浴槽內(nèi)，記錄在海馬 CA1區(qū)放射層誘發(fā)和記錄興奮性突觸后電位(f EPSP)，比較輸入/輸出曲線（I/O）、配對脈沖引起的雙脈沖易化(PPF)、長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)、三組高頻刺激(HFSs)以及卡巴膽堿誘發(fā)的θ波的不同。雄性4個(gè)月ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠和12個(gè)月ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠（老年ApoE4 TG組）比較I/O、PPF、LTP、突觸囊泡循環(huán)和θ波。用熒光染料注射到4個(gè)月ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞層，然后

3、重建染色神經(jīng)元并分析樹突長度和樹突棘數(shù)量。
　　結(jié)果：
　　1.ApoE4 TG組與ApoE3 TG組樹突棘密度的比較:ApoE4 TG組與ApoE3 TG組相比，海馬CA1區(qū)神經(jīng)元樹突長度減短，樹突棘數(shù)量明顯減少，樹突棘密度整體減少。
　　2.興奮性突觸后電位
　　2.1.年輕ApoE4 TG組和年輕ApoE3 TG組I/O、PPF、LTP的比較
　　2.1.1.海馬Schaffer側(cè)枝單個(gè)測試刺激的輸入

4、/輸出曲線:ApoE4 TG組海馬CA1區(qū)單個(gè)4-10V電刺激后所得到的輸入輸出曲線斜率大于ApoE3 TG組。
　　2.1.2.配對脈沖引起的雙脈沖易化:ApoE4 TG組雙脈沖易化與ApoE3 TG組相比增強(qiáng)。
　　2.1.3.突觸后長時(shí)程增強(qiáng):ApoE4 TG組與ApoE3 TG組相比，海馬CA1區(qū)突觸后LTP誘導(dǎo)期減弱（1.38±0.02，1.52±0.02，P<0.0001）。在LTP維持ApoE4 T組仍低于Ap

5、oE3 TG組（1.31±0.01，1.47±0.01，P<0.0001）。
　　2.2.年輕ApoE4 TG組和老年ApoE4 TG組I/O、PPF、LTP的比較。:年輕ApoE4 TG組海馬CA1區(qū)單個(gè)4-10V電刺激后所得到的輸入輸出曲線斜率大于老年 ApoE4 TG組（年輕 ApoE4：0.89±0.07，老年ApoE4：0.49±0.04，P<0.0001）。老年ApoE4 TG組雙脈沖易化與年輕ApoE3 TG組相比（

6、P<0.01）。老年ApoE4 TG組與年輕ApoE3 TG組相比LTP誘發(fā)(LTP強(qiáng)直刺激后0-10min)沒有明顯差別（老年ApoE4：1.34±0.04，年輕ApoE4：1.38±0.02，P>0.05），但LTP維持（強(qiáng)直刺激后50-60min）明顯減弱（老年ApoE4：1.20±0.006，年輕ApoE4：1.31±0.007，P<0.0001）。
　　2.3.ApoE4 TG組與ApoE3 TG組卡巴膽堿誘發(fā)的θ波:A

7、poE4 TG組與ApoE3 TG組相比，卡巴膽堿誘發(fā)的θ波的潛伏時(shí)間長，誘發(fā)的波數(shù)量少。
　　2.4.年輕ApoE4 TG組和年輕ApoE3 TG組突觸囊泡循環(huán):年輕ApoE4 TG組和年輕ApoE3 TG組相比，突觸囊泡循環(huán)沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：
　　1.年輕ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠與相同年齡組ApoE3轉(zhuǎn)基因小鼠相比較神經(jīng)突觸長度及樹突棘密度減少。
　　2.年輕 ApoE4轉(zhuǎn)基因小鼠與年輕 ApoE3轉(zhuǎn)基