多粘芽孢桿菌抗真菌活性的初步研究.pdf

1、多粘芽孢桿菌JW-725(Bacillus polymyxa JW-725)是本實(shí)驗(yàn)室從西藏類烏齊協(xié)馬高山口草甸(海拔4671m)土樣篩選得到的，具有抑制植物病源真菌柑橘青霉菌(Penicillicum italicum)活性的拮抗菌株。 該菌株能利用碳源葡萄糖和可溶性淀粉；能利用氮源蛋白胨，黃豆粉等，不能利用無機(jī)氮源NHaCl和(NH4]~2S04。菌株在富含糖類碳源的培養(yǎng)基中，產(chǎn)生大量粘性物質(zhì)，抑菌活性相對較低；而在富含蛋白

2、胨的培養(yǎng)基中，菌體生長良好且其發(fā)酵液具有較好抑菌活性。 中低溫度對發(fā)酵液抑菌活性影響不明顯，而50℃下培養(yǎng)的發(fā)酵液抑菌活性明顯降低。pH對發(fā)酵液抑菌活性有顯著影響，酸性條件下菌體基本不生長，基本沒有抑菌活性；該菌株對堿性培養(yǎng)基有較好耐受性，并且抑菌活性有部分提高。 以發(fā)酵液的抑菌活性為考察對象，5因素中培養(yǎng)基因素對發(fā)酵液抑菌活性的影響最大。利用正交試驗(yàn)直觀分析法，得到菌株的最佳培養(yǎng)條件：LB培養(yǎng)基，初始pH9.0，通氣量

3、100mL，接種量10[％]，發(fā)酵時(shí)間72h。 通過細(xì)菌細(xì)胞破碎和無菌發(fā)酵液濃縮試驗(yàn)，初步定位抑菌物質(zhì)為胞外物質(zhì)。對發(fā)酵液抑菌物質(zhì)進(jìn)行初步分離，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯酸性萃取物有抑菌活性。 多粘芽孢桿菌JW-725菌株在和指示菌同步培養(yǎng)時(shí)，JW-725抑制菌絲的正常生長，并使一些新生菌絲頂端膨大；一些菌絲粗大，內(nèi)容物聚集，形成較多液泡；一些菌絲空洞塌陷。當(dāng)用其發(fā)酵液打孔法檢測時(shí)，抑菌圈出現(xiàn)“雙圈”現(xiàn)象，內(nèi)圈病原真菌增生堆積，被抑制