巨噬細胞表型在重癥胰腺炎腎損傷中的表達及意義.pdf

1、目的:
　　 有研究發(fā)現(xiàn)巨噬細胞(M(φ))存在兩種不同的激活途徑，在重癥急性胰腺炎(severeacutepancreatitis，SAP)的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。本研究探討大鼠SAP腎損傷時M(φ)表型表達及意義。
　　 方法:
　　 雄性Wistar大鼠64只，隨機分為對照組（SO組）和SAP組，每組32只，采用逆行胰膽管注射?；悄懰徕c(濃度為5％，4ml/kg)制備SAP大鼠模型，于造模后2、6、12

2、及24h分別取血測定血漿中測定尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的改變。同時取胰腺和腎臟組織，HE染色觀察胰腺及腎臟組織形態(tài)學(xué)改變，免疫組織化學(xué)鑒定CD68、iNOS、Arg-1在SAP腎臟中的表達，實時熒光定量PCR(QRT-PCR)檢測腎臟組織IL-12、TNF-α、IL-10、TGF-β的mRNA的表達水平，蛋白質(zhì)印跡法(Westernblotting)檢測蛋白CD68、iNOS、Arg-1的表達。
　　 結(jié)果:
　　

3、 SAP造模后，HE染色發(fā)現(xiàn)12h胰腺組織就出現(xiàn)明顯的病理改變，24h炎癥加劇，腎臟的損害也隨時間的增加呈進行性加重。免疫組化及Westernblotting檢測顯示，SAP組各時間點腎臟均有CD68的表達。與SO組相比，M(φ)1相關(guān)蛋白iNOS在造模后2h開始升高，并于12h達高峰;M(φ)2相關(guān)蛋白Arg-1于12h開始持續(xù)升高對抗炎癥反應(yīng)。QRT-PCR結(jié)果顯示，SAP組M(φ)1相關(guān)的炎癥因子IL-12，TNF-α從2h開始升

4、高，12h達高峰;M(φ)2相關(guān)的抗炎因子IL-10，TGF-β則從12h起開始表達增多，24h更加明顯。
　　 結(jié)論:
　　 SAP大鼠腎損傷時，腎臟組織M(φ)1相關(guān)的炎性因子IL-12，TNF-α，iNOS表達量從2h開始升高，12h達高峰，M(φ)2相關(guān)的抗炎因子IL-10，TGF-β，Arg-1表達量從12h后才開始增加，并于24h得到最高觀察值。由此我們推斷:在SAP腎損傷時，12h內(nèi)由經(jīng)典途徑激活的M(φ)