龍眼參多糖對(duì)氟中毒大鼠肝腎損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：建立大鼠氟中毒模型；研究龍眼參多糖(LYSP)對(duì)氟中毒大鼠肝、腎損傷的保護(hù)作用并探討其機(jī)制。
　　 方法：Wistar大鼠60只隨機(jī)分成5組：正常對(duì)照組(NC組)、模型對(duì)照組(NaF組)、龍眼參多糖低劑量組(LYSPL組)、龍眼參多糖中劑量組(LYSPM組)和龍眼參多糖高劑量組(LYSPH組)。除正常對(duì)照組外，其余4組大鼠給予飲用高氟水([F-]150mg·L-1)12周復(fù)制慢性氟中毒模型。自給予高氟水后的第8周各組開始灌

2、胃給藥，正常對(duì)照組、模型對(duì)照組給予蒸餾水，龍眼參多糖低、中、高劑量組分別給予龍眼參多糖(LYSP)0.15g·kg-1(相當(dāng)于生藥13.24g·kg-1)、0.30g·kg-1(相當(dāng)于生藥26.48g·kg-1)、0.60g·kg-1(相當(dāng)于生藥52.96g·kg-1)，給藥體積均為10mL·kg-1體重，每天1次，給藥時(shí)間共4周。給藥4周后處死大鼠，采集標(biāo)本進(jìn)行如下處理：
　　 1.測(cè)定各組大鼠血清中氟離子濃度及血清生化指標(biāo)；

3、測(cè)定各組大鼠血清中的Ca2+濃度及肝腎組織中的Ca2+濃度。
　　 2.測(cè)定各組大鼠肝臟丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量，檢測(cè)各組大鼠肝臟總抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮合酶(NOS)、谷胱甘肽-過(guò)氧化物酶(GSH-Px)以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。
　　 3.測(cè)定各組大鼠腎臟丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量，檢測(cè)各組大鼠腎組織中一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽-過(guò)氧

4、化物酶(GSH-Px)活性。
　　 4.在光鏡下觀察各組大鼠肝、腎組織傷程度。采用免疫組化方法觀察肝、腎組織的Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.血清生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示，造模第12周后：與正常對(duì)照組比較，模型組血清中氟離子濃度([F-])顯著升高(P＜＜0.0)，與模型組比較，龍眼參多糖給藥組血清[F-]無(wú)差異(P＞0.05)。各組大鼠血清CO2-CP無(wú)差異(P＞0.05)。與正常對(duì)照組比

5、較，模型組血清總蛋白下降，球蛋白升高，A/G下降(P＜0.01)；血清ALT，AST，膽紅素以及γ-GT升高(P＜0.01)；血清BUN，CR升高(P＜0.01)，UA下降(P＜0.01)；血清ALP，LDH升高(P＜0.01)。與模型組比較，龍眼參多糖給藥組血清總蛋白升高，其中LYSPM組和LYSPH組(P＜0.01)，球蛋白下降，A/G升高(P＜0.01)；血清ALT，AST，膽紅素以及γ-GT下(P＜0.01)；血清BUN，CR下

6、降(P＜0.01)及UA在正常范圍內(nèi)升高(P＜0.01)；血清ALP，LDH下降(P＜0.01)。
　　 2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組比較，氟中毒模型組大鼠血清Ca2+濃度明顯降低(P＜0.01)，肝、腎組織中Ca2+含量升高(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，龍眼參多糖給藥組與模型組無(wú)差異(P＞0.05)，未能改善氟中毒模型大鼠血清中缺鈣的現(xiàn)象，且肝、腎組織中Ca2+含量升高。
　　 3.肝臟氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示

7、，造模第12周后：與正常對(duì)照組比較，模型組肝臟MDA，NO升高(均P＜0.01)；肝臟T-AOC下降，GSH-Px及SOD活性下降，tNOS及iNOS活性升高(均P＜0.01)。與模型組比較，龍眼參多糖給藥組肝臟MDA，NO下降；肝臟T-AOC，GSH-Px及SOD活性升高，tNOS，iNOS活性降低。
　　 4.腎臟氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示，造模第12周后：與正常對(duì)照組比較，模型組腎臟MDA升高，NO升高(均P＜0.01)

8、；腎臟SOD，GSH-Px活性下降，tNOS，iNOS，cNOS活性升高(均P＜0.01)。與模型組比較，龍眼參多糖給藥組腎臟MDA，NO下降；腎臟SOD，GSH-Px活性升高，腎臟tNOS，iNOS活性降低。
　　 5.肝組織、腎組織病理學(xué)觀察，結(jié)果顯示龍眼參多糖(LYSP)各組都能在一定程度上減輕肝組織、腎組織的損傷。
　　 與正常對(duì)照組比較，各組肝組織Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)不明顯。
　　 與正常對(duì)照組比

9、較，模型組Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)均明顯升高(P＜0.01)；與模型組比較LYSPM組和LYSPH組腎組織Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增高(P＜0.01或P＜0.05)，而Bax蛋白表達(dá)及Bax/Bc-2的比值明顯降低(P＜0.01或P＜0.05)。提示龍眼參多糖對(duì)氟中毒大鼠腎損傷的保護(hù)作用可能與其影響腎組織Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)有關(guān)。
　　 結(jié)論：龍眼參多糖(LYSP)能減輕氟中毒大鼠肝腎損傷，對(duì)氟中毒大鼠肝腎損傷具有保護(hù)作用