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文檔簡介
1、砂生槐(Sophora moorcroftiana)是我國特有的高原植物,其種子具有消炎解毒、催吐的功效,主治濕熱黃疸、白喉、痢疾、赤巴病、消化不良、寄生蟲病等。砂生槐種子的不同溶劑提取物具有抑菌、殺蟲、抗腫瘤及增強(qiáng)荷瘤小鼠免疫功能的作用。本研究提取、純化砂生槐種子多糖,并分析多糖的組成成分。選用的秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans, C. elegans)為模式生物,觀察砂生槐種子多糖對秀麗隱桿線蟲壽命、行為、
2、應(yīng)激、生殖和抗菌能力的影響,為砂生槐種子多糖藥用價(jià)值的開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
采用60%乙醇醇沉法提取砂生槐種子多糖,氯仿反復(fù)萃取除去脂溶性成分,苯酚-硫酸法用于測定砂生槐種子多糖的含量。砂生槐種子多糖經(jīng)Sevege法脫蛋白,氧化脫色素,氣相色譜-質(zhì)譜法聯(lián)用分析組成成分。用砂生槐種子多糖,水提取物,氯仿提取物和乙醇提取物分別干預(yù)L4期秀麗隱桿線蟲,計(jì)算秀麗隱桿線蟲的生存率,分析各組藥物對線蟲毒性效應(yīng)。砂生槐種子多糖干預(yù)秀麗隱桿線蟲
3、從L1期至L4期全部發(fā)育過程,在顯微鏡下觀察線蟲的生命周期、行為學(xué)變化、應(yīng)激條件下存活時(shí)間,計(jì)數(shù)線蟲排卵數(shù)目、線蟲排卵時(shí)程和砷化物誘導(dǎo)的生殖細(xì)胞凋亡數(shù)目,并建立秀麗隱桿線蟲綠膿桿菌感染模型,記錄線蟲的生存率和體內(nèi)綠膿桿菌載菌量。
砂生槐種子多糖的含量為82.23%(產(chǎn)率為8.8%),氣相色譜-質(zhì)譜法聯(lián)用分析砂生槐種子多糖含有葡萄糖,半乳糖和肌醇,其中葡萄糖的含量為35%。砂生槐種子多糖(4mg/ml)延長了秀麗隱桿線蟲的生命周
4、期至27天,是對照組(15天)的1.7倍(p=0.041),同時(shí)的增強(qiáng)了秀麗隱桿線蟲對抗熱應(yīng)激和氧化應(yīng)激的能力,平均壽命分別是對照組的1.5倍(p=0.027)和1.6倍(p=0.018)。砂生槐種子多糖提升秀麗隱桿線蟲生殖能力,4mg/ml和2mg/ml組排卵數(shù)目分別是481個(gè)和486個(gè),與對照組(230個(gè))相比都增加1.0倍(p<0.01)。砂生槐種子多糖(4mg/ml和2mg/ml)分別延長秀麗隱桿線蟲的排卵時(shí)間至8.0天和7.9
5、天,而對照組僅為6.1天(p>0.05)。砂生槐種子多糖(4mg/ml)增強(qiáng)秀麗隱桿線蟲抗細(xì)菌感染的作用,與模型對照組相比,延長綠膿桿菌感染線蟲的壽命2.4倍(p=0.013),并顯著降低線蟲體內(nèi)綠膿桿菌的載菌量(p=0.014),促進(jìn)線蟲清除體內(nèi)綠膿桿菌。
砂生槐種子多糖主要由葡萄糖,半乳糖和肌醇組成,其中葡萄糖為最主要的組成成分。砂生槐種子多糖可以延長秀麗隱桿線蟲生命周期,并增強(qiáng)了秀麗隱桿線蟲抗應(yīng)激、抗衰老的能力,有效促進(jìn)
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