包蟲病所致過敏性休克危險因素的識別和肺組織差異基因表達的研究.pdf

1、目的：在包蟲病的臨床實踐中，因手術、外傷、自發(fā)性囊腫破裂等導致的過敏性休克為該病嚴重的并發(fā)癥，其來勢兇猛，處置不當可致嚴重后果，甚至死亡。目前對于包蟲所致過敏性休克的研究甚少，且都是在過敏的動物模型的基礎上復制，并不能夠代表臨床，使得一直以來圍術期包蟲所致過敏性休克的研究處于停滯狀態(tài)。如果在臨床已發(fā)病例的基礎上能夠通過回顧性的研究調查明確圍術期發(fā)生包蟲所致過敏性休克的危險因素，對以后預行包蟲手術的患者進行提前合理的預防，來降低發(fā)生率、改

2、善預后，為建立包蟲病患者致過敏性休克的防治策略提供科學依據。目前認為過敏反應是一種由多個基因協(xié)同作用、由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的免疫性遺傳病，由相當多的微效基因共同參與加上環(huán)境因素的協(xié)同而發(fā)病。各個基因之間、多個基因與環(huán)境之間的交互作用可能對過敏性疾病的發(fā)生起著推動作用?；蛐酒夹g可以從多角度對具體病例的基因特征進行分析。通過掃描分析，得出基因表達的差異信息，從而對闡明包蟲所致過敏性休克的分子遺傳學發(fā)病機制、早期基因診斷和藥物敏感

3、性基因的篩選提供參考。
　　方法：⑴2008年1月—2013年9月新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院共收治細粒棘球蚴病擬行手術治療的患者。過敏性休克病例16例。對照組：未發(fā)生過敏性休克病例43例。對患者的所有人口學、影像學、臨床資料、免疫學進行匯總比較，揭示圍術期包蟲病所致過敏性休克患者的臨床與免疫學危險因素。⑵對兩例反復發(fā)生包蟲所致過敏性休克患者的免疫學特性和圍術期管理進行分析找出規(guī)律。⑶從屠宰場自然感染 Eg的綿羊肝臟中采集新鮮原頭蚴（

4、PSC），經1％的胃蛋白酶消化后檢測蟲體活性并計數(shù)，于37℃、5%CO2條件下體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)的不同時間點隨機取適量樣品于倒置顯微鏡下觀察、拍照并記錄原頭蚴生長發(fā)育情況，通過透射電子顯微鏡觀察培養(yǎng)囊泡的超微結構；分別將體外培養(yǎng)獲得的Eg微囊以每鼠50個微囊的劑量，通過腹腔注射的方法分別接種C57小鼠，建立小鼠繼發(fā)性感染模型。⑷建立棘球蚴繼發(fā)感染小鼠動物模型，模擬臨床使用囊液對包蟲小鼠致敏建立小鼠包蟲過敏反應模型，通過對小鼠肺組織進行基因

5、表達譜芯片分析，分析其差異表達基因及通路。
　　結果：①IL-4水平與囊腫的大小是圍術期導致包蟲病所致過敏性休克的獨立的危險因素。當術前IL-4的水平大于415.67ng/ml的閾值時有發(fā)生圍術期包蟲所致過敏性休克的風險，靈敏度為75.0％，特異性為97.7％的。②當B超或是CT顯示術前囊腫大小大于7.8厘米的閾值時，術中囊腫破裂的風險較大，靈敏度為81.3％的，特異性為76.7％的。③患者年齡每增加1歲，患者過敏性休克發(fā)生的風險

6、降為原來的0.962倍。IL-4差值每增加1，患者過敏性休克發(fā)生的風險升高為原來的1.014倍；IL-10差值每增加1，患者過敏性休克發(fā)生的風險降低為原來的0.677倍，提示若細粒棘球蚴患者擬行包蟲手術，且術前包囊直徑超過7.8cm的患者，可采用術前降低IL-4或提高IL-10的方法來減輕或避免過敏性休克的發(fā)生。④第一次行包蟲手術發(fā)生過敏性休克的患者，在第二次術前嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞的水平仍然高于基礎水平，且抗 EgCF和抗EgB

7、抗體呈現(xiàn)+++，術前IgG水平增高明顯。⑤棘球蚴病所致過敏性休克不同于Ⅰ型變態(tài)反應，除IgE水平升高外，還同時伴隨有IgG1水平的升高；同時伴隨有介質不同程度的釋放增加，例如：組胺、PAF、TXB2。⑥通過基因表達譜的分析發(fā)現(xiàn)：在有無發(fā)生過敏反應時差異表達的基因集中在與代謝相關的基因、參與炎癥反應的基因、與細胞凋亡相關的基因、和與免疫應答相關的基因上；而相關通路集中在MAPK信號通路、G蛋白偶聯(lián)受體轉導通路、花生四烯酸代謝通路、Wnt通

8、路、Spliceosome通路、TGF-β信號途徑都參與了過敏的發(fā)生發(fā)展過程。
　　結論：⑴IL-4的水平大于415.67ng/ml，囊腫大小大于7.8厘米是圍術期發(fā)生包蟲所致過敏性休克的獨立的危險因素。⑵第一次行包蟲手術發(fā)生過敏性休克的患者，在第二次術前嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞的水平仍然高于基礎水平，且抗EgCF和抗EgB抗體呈現(xiàn)+++，術前IgG水平增高明顯。仍有發(fā)生第二次過敏性休克的可能。⑶棘球蚴病所致過敏性休克除IgE水