漢黃芩素體外抗乳腺癌作用研究.pdf

1、癌癥是威脅人類健康的重大疾病，癌癥的分子發(fā)病機制和生物治療一直以來都是學者們研究的重點。隨著人們對癌癥的發(fā)病機理認識的不斷深入，在以往化學治療、放射治療、手術治療三大療法的基礎上，衍生出多種針對不同發(fā)病機理的抗癌藥物治療。但由于大多數(shù)抗癌藥物在作用于靶細胞時往往涉及正常細胞，且目前臨床上用于治療腫瘤的化學藥物都有不同程度的致突變性，因此在治療腫瘤的同時也增加了病人患第二種腫瘤的可能性，因此目前從天然物質(zhì)中尋找毒副作用小、安全有效的抗癌藥

2、物成為近些年的研究熱點。本論文主要針對中草藥黃芩中漢黃芩素的提取及其抗腫瘤作用進行研究。
　　 本論文從黃芩中提取了漢黃芩素。將黃芩樣品粉碎后，使用95％乙醇在索氏提取器中進行回流提取，再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，得到漢黃芩素粗提物。使用制備型HPLC將此粗提物中相應組分合并收集并經(jīng)過濾后，再次通過制備型HPLC進行進一步的分離純化，收集目的產(chǎn)物，經(jīng)結(jié)晶后得到漢黃芩素純品。
　　 本論文進而研究了漢黃芩素對腫瘤細胞增殖、凋亡

3、的影響，探討其作用機制。采用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測漢黃芩素對結(jié)腸癌HT-29細胞，乳腺癌MCF-7細胞，前列腺癌PC-3細胞和子宮頸癌HeLa細胞的抗腫瘤作用，用流式細胞儀檢測MCF-7細胞周期分布及bcl-2、bax蛋白含量，并用相應的檢測試劑盒對MCF-7細胞線粒體膜電位和caspase-3的活性進行測定。實驗結(jié)果表明，漢黃芩素對四種腫瘤細胞的增殖均有明顯的抑制作用，但對于不同組織來源的細胞其抑制強度不盡相同。40gmo

4、l/L漢黃芩素對結(jié)腸癌HT-29細胞，乳腺癌MCF-7細胞，前列腺癌PC-3細胞和子宮頸癌HeLa細胞24h的抑制率分別為32.74％，51.42％，44.17％和35.63％，且抑制作用隨漢黃芩素濃度的增加和作用時間的延長而增強，呈現(xiàn)明顯的劑量和時間依賴關系。其中，漢黃芩素對MCF-7細胞的抑制作用最為顯著，20μmol/L漢黃芩素作用MCF-7細胞24h，可使其凋亡率達到33.41％，線粒體膜電位下降56.55％，bcl-2蛋白表達