長鏈非編碼RNA H19基因多態(tài)性與急性冠脈綜合征發(fā)病風(fēng)險及相關(guān)危險因素的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、背景:冠心病(coronary artery disease，CAD)指冠狀動脈粥樣硬化使血管腔狹窄或阻塞，和（或）因冠狀動脈功能性改變（痙攣）導(dǎo)致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟病，亦稱缺血性心臟病，是目前世界范圍內(nèi)主要致死性疾病之一。在中國，急性冠脈綜合征的發(fā)病率逐年上升，因急性冠脈綜合征死亡的人數(shù)逐年遞增。近年來，全基因組相關(guān)聯(lián)研究（genome-wide association study，GWAS）揭示出越來越多的基因多態(tài)性(S

2、NP)與CAD（包括ACS）發(fā)病風(fēng)險密切相關(guān)。人類基因組序列中約有5％-10％的序列被穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄，除約1％的序列為蛋白質(zhì)編碼基因外，絕大部分為non-codingRNAs(ncRNAs)。根據(jù)ncRNAs的長度，可分為轉(zhuǎn)錄起始RNA(tiRNA)、Piwi蛋白相互作用RNA(piRNA)、微小RNA(microRNA)、小核仁RNA(snoRNA)和長鏈非編碼RNA(lncRNA，＞200nt)等。長鏈非編碼RNA（long non-co

3、ding RNA，lncRNA）是非編碼RNA家族的重要成員之一，是目前生命科學(xué)研究領(lǐng)域中的熱點。盡管lncRNA通常不直接參與編碼蛋白，但其卻可以在細(xì)胞生命活動過程中發(fā)揮重要的調(diào)控功能。H19基因?qū)儆趌ncRNA家族的重要成員之一，其廣泛參與了各種病理生理過程的調(diào)控。有研究表明H19基因參與了冠心病的動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程，其中rs217727和rs2067051兩個多態(tài)位點已經(jīng)證實與冠心病的發(fā)病風(fēng)險存在密切關(guān)系，故我們擬采用病例

4、-對照研究，選擇H19目前研究最熱的3個基因多態(tài)，研究其與急性冠脈綜合征的關(guān)系，以揭示H19基因多態(tài)性與ACS發(fā)病風(fēng)險及相關(guān)危險因素和臨床特征的相關(guān)分析之間的關(guān)系。
　　目的:本文旨在探討長鏈非編碼RNA H19基因rs2735971、rs2839698、rs3024270三個SNPs與急性冠脈綜合征發(fā)病風(fēng)險之間的關(guān)系以及相關(guān)危險因素和臨床特征中的預(yù)警作用。
　　研究方法:本研究收集了遼寧省漢族人群包括ACS患者（共209名

5、）及與其同期年齡、性別匹配的對照人群（共186名）。應(yīng)用KASPar的方法檢測rs2735971、rs2839698、rs3024270進(jìn)行基因分型，同時對比病例組和對照組兩組之間性別、年齡、以及基因分布情況;采用多重回歸模型及計算基因單倍體分析基因多態(tài)位點與ACS的發(fā)病風(fēng)險;通過Logistic回歸、MDR軟件分析基因多態(tài)性位點與ACS的基因間基因交互作用。SNP間交互作用應(yīng)用多重回歸模型進(jìn)行評估，并對年齡、性別因素進(jìn)行校正。在進(jìn)行臨

6、床特征與基因多態(tài)關(guān)系的分析時，首先選取基因多態(tài)致病的主要作用模型，當(dāng)顯性模型對于疾病貢獻(xiàn)的P值小于隱性模型時，則選用顯性模型分組進(jìn)行與臨床特征關(guān)系的分析，反之則選用隱性模型。P＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)H19 rs2735971多態(tài)GA雜合子與GG野生基因型相比，罹患急性冠脈綜合征的發(fā)病風(fēng)險降低到0.50倍(P=0.003，95％CI=0.32-0.80)。該多態(tài)的隱性模型和等位基因模型同樣發(fā)病風(fēng)險降低

7、到0.52或0.61倍(分別為P=0.004，95％CI=0.33-0.81或P=0.011，95％CI=0.41-0.89)。這種效應(yīng)在女性、非吸煙者、非飲酒者亞組中更明顯(分別為OR=0.29; OR=0.44heOR=0.40)。在H19 rs2839698多態(tài)CT+TT基因型存在的條件下，H19 rs2735971顯性模型存在上位效應(yīng)，罹患急性冠脈綜合征的發(fā)病風(fēng)險降低更為顯著(OR=0.36)。而H19的rs2839698和rs

8、3024270多態(tài)與急性冠脈綜合征的發(fā)病風(fēng)險未見明顯相關(guān)性(P＞0.05)，但H19 rs2839698多態(tài)在老年人亞組中顯性模型提高了罹患急性冠脈綜合征的發(fā)病風(fēng)險。H19 rs3024270多態(tài)在男性和非吸煙者亞組降低了罹患冠脈綜合征的發(fā)病風(fēng)險。在單體型分析中，H19 rs2735971-rs2839698-rs3024270多態(tài)A-C-C單體型降低了罹患急性冠脈綜合征的發(fā)病風(fēng)險到0.55倍(P=0.010，95％CI=0.35-0.

9、87)。采用多因素Logistic回歸分析，發(fā)現(xiàn)三種多態(tài)與宿主環(huán)境因素吸煙飲酒未見交互作用。但采用MDR分析，發(fā)現(xiàn)H19rs2735971-吸煙-飲酒構(gòu)成的三因子預(yù)測模型可以提示急性冠脈綜合征的發(fā)病風(fēng)險，但該預(yù)測模型在積累效應(yīng)中未得到驗證。在進(jìn)行相關(guān)危險因素分析時，H19rs2735971和rs2839698多態(tài)選用顯性模型進(jìn)行分析，而rs3024270多態(tài)選用隱性模型。我們發(fā)現(xiàn)，H19 rs2735971多態(tài)變異型GA+AA基因型與野

10、生型相比，甘油三酯含量正常者居多，即含量過高者居少(P=0.039)，且定量分析結(jié)果顯示，該多態(tài)變異型者甘油三酯含量的均值低于野生型者（1.76±1.25 vs.2.69±2.77，P=0.044）。H19rs3024270多態(tài)CC變異基因型與GG+GC基因型相比，低密度脂蛋白的含量普遍降低（2.36±1.00 vs.2.98±1.01，P=0.005）。而這三種多態(tài)對冠脈病變嚴(yán)重程度未見相關(guān)性。
　　結(jié)論:H19基因多態(tài)性(rs