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文檔簡介
1、目的:通過觀察局部亞低溫對(duì)大鼠腦出血后神經(jīng)功能缺失、血腫周圍腦組織形態(tài)學(xué)變化以及血清中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)和s-100β蛋白濃度的影響,明確NSE和s-100β蛋白在早期診斷腦損傷、評(píng)估腦出血嚴(yán)重程度及預(yù)測(cè)預(yù)后的作用,探討局部亞低溫發(fā)揮腦保護(hù)作用的可能機(jī)制,為局部亞低溫的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
方法:⑴隨機(jī)將60只健康雄性SD大鼠分成三組:局部亞低溫組(20只)、常溫組(20只)、假手術(shù)組(20只)。各組按不同的斷頭
2、取腦時(shí)間點(diǎn)分為術(shù)后6h、1d、3d和7d總共4個(gè)亞組,每個(gè)亞組5只大鼠。⑵以“自體血注入法”建立大鼠腦出血模型。局部亞低溫組和常溫組以大鼠自體不抗凝血50μL注入右側(cè)尾狀核,假手術(shù)組不注血。⑶評(píng)價(jià)腦出血造模是否成功。⑷局部亞低溫干預(yù),將麻醉好的大鼠右側(cè)頭顱置于冰袋上,持續(xù)3h,期間維持大鼠鼓膜溫度在32℃~33℃之間。局部亞低溫6h組在確定造模成功后立即實(shí)施局部亞低溫,1d組、3d組和7d組每天固定時(shí)間給予局部亞低溫。常溫組和假手術(shù)組僅
3、給予等量藥物麻醉,維持鼓膜溫度在36℃~37℃。⑸按Garcia評(píng)分觀察各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能缺失情況。⑹采集大鼠血清及腦組織標(biāo)本,酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中NSE和s-100β蛋白濃度,腦組織HE染色,觀察腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變。⑺全部資料用SPSS17.0進(jìn)行分析,數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,P<0.05表示差異有意義。
結(jié)果:①神經(jīng)功能缺失評(píng)分(NDS):局部亞低溫組和常溫組在各時(shí)間點(diǎn)的神經(jīng)功能缺失評(píng)分均低于假手術(shù)組
4、,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與同組內(nèi)其他時(shí)間點(diǎn)相比,局部亞低溫組和常溫組均以3d組神經(jīng)功能缺失評(píng)分最低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。局部亞低溫組在各時(shí)間點(diǎn)的神經(jīng)功能缺失評(píng)分均高于相應(yīng)的常溫組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。②腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變:假手術(shù)組腦組織中神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完整,胞核、胞漿染色均勻。常溫組6h組、1d組血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞水腫明顯,可見大量紅細(xì)胞,少量炎癥細(xì)胞;3d組血腫周圍的神經(jīng)元明顯水腫壞死,核
5、固縮深染,紅細(xì)胞減少,中性粒細(xì)胞浸潤,偶見膠質(zhì)細(xì)胞增生;7d組可見血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞水腫較前減輕,中性粒細(xì)胞減少,大量膠質(zhì)細(xì)胞增生。局部亞低溫組的腦組織結(jié)構(gòu)變化在6h組、1d組與常溫組相似,3d組、7d組神經(jīng)細(xì)胞腫脹壞死范圍較常溫組小,可見少量炎癥細(xì)胞浸潤及膠質(zhì)細(xì)胞增生。③局部亞低溫組和常溫組在各時(shí)間點(diǎn)的血清NSE含量均高于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與同組內(nèi)其他時(shí)間點(diǎn)相比,局部亞低溫組和常溫組血清NSE含量均以3d組最高
6、,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);局部亞低溫組在各時(shí)間點(diǎn)的NSE含量均低于常溫組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。④局部亞低溫組和常溫組在各時(shí)間點(diǎn)的血清s-100β蛋白濃度均高于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與同組內(nèi)其他時(shí)間點(diǎn)相比,局部亞低溫組和常溫組血清s-100β蛋白含量均以3d組最高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);局部亞低溫組在各時(shí)間點(diǎn)的s-100β蛋白濃度均低于常溫組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑤大
7、鼠腦出血后血清中NSE濃度與NDS呈負(fù)相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=-0.765,P=0.000);血清中的s-100β蛋白濃度與NDS呈負(fù)相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=-0.680,P=0.001);s-100β蛋白濃度變化與血清NSE濃度變化呈正相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.951,P=0.000)。
結(jié)論:⑴自體不抗凝血制作SD大鼠尾狀核腦出血模型定位準(zhǔn)確,成功率高,重復(fù)性好。⑵腦出血后血清NSE和s-100β蛋白含量與神
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