PICK1在睪丸組織中的表達(dá)及其與男性生育力關(guān)系的初步研究.pdf

1、目的：
　　 據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計,全球約10％-15％的育齡夫婦存在不孕不育問題,男性因素占49％左右,其中無精癥是男性不育的重要原因之一。對于生精功能輕度受抑的無精癥患者,通過卵胞漿內(nèi)單精子注射(intra-cytoplasmic sperminiection,ICSI)可以獲得生育后代的機(jī)會,但I(xiàn)CSI技術(shù)本身的遺傳學(xué)風(fēng)險不容忽視:對于睪丸內(nèi)無精子生成或精子極少的患者,目前臨床上尚無有效的治療方法。如何使無精癥患者經(jīng)濟(jì)安全的

2、獲得親緣性后代成為臨床研究亟待解決的問題。
　　 蛋白激酶Ca相互作用蛋白-PICK1(proteininteracting with Cα kinase1)于1995年首次發(fā)現(xiàn),能與40多種蛋白發(fā)生相互作用,執(zhí)行多種功能,廣泛分布于機(jī)體的各種組織(腦和睪丸中含量最高,肺中含量最低)。PICK1蛋白含一個PDZ結(jié)構(gòu)域和一個BAR結(jié)構(gòu)域,PDZ結(jié)構(gòu)域能和許多膜蛋白結(jié)合,而BAR結(jié)構(gòu)域能與脂質(zhì)分子(主要為磷酸肌醇)相結(jié)合,通過這種機(jī)

3、制PICK1可調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白的亞細(xì)胞定位和膜表達(dá)。
　　 PICK1與絕大多數(shù)配體蛋白的相互作用是通過其PDZ結(jié)構(gòu)域與配體C末端區(qū)域的結(jié)合介導(dǎo)的,使。PICK1的PDZ結(jié)構(gòu)域成為一個潛在的藥物靶點。因此,可以利用生物小分子物質(zhì)特異性地結(jié)合PICK1的PDZ結(jié)構(gòu)域,干擾或阻斷PICK1與配體蛋白的天然相互作用,最終達(dá)到治療相關(guān)疾病的目的。
　　 目前國內(nèi)外對該因子的研究主要側(cè)重于其在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用機(jī)制,如:參與學(xué)習(xí)與記憶,

4、參與外周神經(jīng)感覺過程,參與神經(jīng)介質(zhì)傳遞與調(diào)節(jié)等。PICK1在神經(jīng)元以外細(xì)胞中的功能還未進(jìn)行深入研究。最近有研究表明:PICK1可以通過干擾精子頂體的形成造成小鼠不育,基因敲除PICK1的小鼠的睪丸體積減小、精子頂體畸形,同時敲除PICK1基因的小鼠生精小管凋亡增加。
　　 基于此,設(shè)計本研究,旨在通過檢測PICK1在不同病理分型的無精癥患者睪丸組織中表達(dá)的差異,探討精子發(fā)生是否與PICK1表達(dá)強(qiáng)度有關(guān),通過PICK1表達(dá)強(qiáng)度與受

5、精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率及臨床妊娠率的關(guān)系,初步探討PICK1與男性生育力的相關(guān)性。
　　 方法：
　　 選擇鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖中心就診的無精子癥患者,睪丸容積均≥12 ml,排除染色體異常,取睪丸組織行睪丸病理論斷及PICK1檢測。根據(jù)不同病理分型結(jié)合Johnson評分分成四組:唯支持細(xì)胞綜合征(SCOS)組14例、生精功能阻滯(MA)組12例、生精功能低下(HS)組9例,生精功能基本正常(OA)組15例,采用免

6、疫組化方法檢測PICK1在四種病理分型的無精癥患者睪丸組織中的表達(dá)情況,并使用圖文分析系統(tǒng)測量PICK1的積分光密度(IOD)值。生精功能正常組和生精功能低下組患者進(jìn)一步用睪丸精子行ICSI助孕治療,分析兩組患者ICSI后的受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率和臨床妊娠率,探討PICK1與男性生育力的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 1.PICK1在四種病理分型的無精癥患者睪丸組織中的表達(dá):PICK1蛋白在唯支持細(xì)胞綜合征、生精功能阻

7、滯組、生精功能低下組、生精功能基本正常組的IOD值分別為1.91±1.01、106.73±8.70、127.79±4.94、147.67±7.48；PICK1在四組中的表達(dá)量,呈現(xiàn)明顯上升趨勢,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05；
　　 2.PICK1與男性生育力的相關(guān)性:生精功能低下組和生精功能基本正常組在受精率方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義(69.1％vs82.8％,P<0.05)；兩組的卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率和臨床妊娠率差異無顯著性(6