環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)四倍體櫛孔扇貝胚胎及早期幼蟲的影響.pdf

1、本文以櫛孔扇貝(Chlamys ferreri)為研究對(duì)象，利用細(xì)胞松弛素B(CB)抑制櫛孔扇貝受精卵第一極體(PBl)釋放，獲得四倍體材料。研究在不同環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)條件下，藥物誘導(dǎo)后的櫛孔扇貝胚胎及早期幼蟲的發(fā)育情況，以及早期幼蟲倍化率的變化情況。 本實(shí)驗(yàn)總共設(shè)2個(gè)環(huán)境因子和5個(gè)營(yíng)養(yǎng)因子：溫度、鹽度、谷氨酸、?；撬?、谷氨酰胺、葡萄糖、維生素C。通過(guò)統(tǒng)計(jì)各實(shí)驗(yàn)組的囊胚、原腸胚、擔(dān)輪幼蟲、畸形幼蟲及滯育幼蟲的比例，以及檢測(cè)擔(dān)輪幼蟲和D

2、形幼蟲兩個(gè)時(shí)期的幼蟲倍性組成，來(lái)揭示四倍體櫛孔扇貝胚胎及早期幼蟲的一些生理特性。結(jié)果顯示，從囊胚到擔(dān)輪幼蟲，處理組均以20℃組發(fā)育最佳，而進(jìn)入孵化期后，22℃組的孵化率顯著高于其他組，這說(shuō)明了處理組存在著溫度補(bǔ)償，適當(dāng)?shù)靥岣邷囟瓤梢源龠M(jìn)四倍體胚胎的孵化。同時(shí)發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)后的四倍體胚胎對(duì)溫度和鹽度的變化比較敏感，最適鹽度和溫度范圍均縮小了，分別為18-22℃和鹽度30-34。而從添加營(yíng)養(yǎng)因子的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看：胚胎發(fā)育過(guò)程中對(duì)谷氨酸需求量越來(lái)越大

3、，谷氨酸的最佳添加量由囊胚時(shí)期的0.5μmol/L上升至孵化時(shí)期的2.5μmol/L；在囊胚至擔(dān)輪幼蟲的發(fā)育過(guò)程中40μmol/L濃度的谷氨酰胺可以顯著促進(jìn)胚胎的發(fā)育；10 mmol/L的?；撬釀t可以顯著提高囊胚率，但是隨著胚胎的進(jìn)一步發(fā)育，其對(duì)牛磺酸的需求越來(lái)越小，至擔(dān)輪幼蟲時(shí)期只有5mmol/L濃度的牛磺酸起作用積極的作用：葡萄糖對(duì)囊胚的發(fā)育沒(méi)有積極的幫助，而進(jìn)入原腸胚時(shí)期時(shí)，胚胎對(duì)葡萄糖濃度的需量逐漸增加，到了擔(dān)輪幼蟲時(shí)期，2mm

4、ol/L濃度的葡萄糖可以大大提高擔(dān)輪幼蟲的比例，顯著降低胚胎的畸形率和滯育率；0.009g/L濃度的維生素C顯著促進(jìn)囊胚的發(fā)育，而高濃度的維生素C則抑制胚胎的發(fā)育，進(jìn)入原腸胚時(shí)，胚胎對(duì)維生素C的需求量減少了，當(dāng)胚胎發(fā)育至擔(dān)輪幼蟲時(shí)期時(shí)，維生素C添加組除了0.003g/L組外，其他處理組均比對(duì)照組低。 本研究初步探明四倍體櫛孔扇貝胚胎及早期幼蟲的發(fā)育情況，以及其對(duì)環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)的需求情況，首次報(bào)道了櫛孔扇貝四倍體誘導(dǎo)后的胚胎幼蟲存在溫