基于代謝組學(xué)技術(shù)研究蜂毒對SD大鼠內(nèi)源性代謝的影響.pdf

1、近幾年來，代謝組學(xué)已在生命科學(xué)領(lǐng)域領(lǐng)域占據(jù)一席之地，也成為生物研究中一個重要的、有價值的工具，并在不斷創(chuàng)新的分析技術(shù)的協(xié)同下逐步穩(wěn)定發(fā)展。同時，蜂毒的在臨床應(yīng)用方面的研究也廣泛展開，蜂毒作為具有高度藥理學(xué)和生物學(xué)活性的物質(zhì)，在治療風(fēng)濕類疾病方面具有顯著療效，在癌癥的臨床治療中也體現(xiàn)出了巨大潛力。但是，蜂蟄行為以及蜂毒成分對生物機(jī)體內(nèi)源性代謝影響方面的研究卻仍有較大發(fā)展空間。
　　本研究建立了針對SD大鼠蟄刺和針刺的動物模型模型，在

2、此基礎(chǔ)上建立基于聯(lián)用技術(shù)的代謝組學(xué)高通量分析方法，并將其應(yīng)用于對蜂毒和蜂蜇行為刺激后生物標(biāo)志物的驗(yàn)證與確認(rèn)。通過對空白組、創(chuàng)傷組、實(shí)驗(yàn)組SD大鼠的血清樣本進(jìn)行分析，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，輔以ROC值檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)等方法篩選出相關(guān)的差異代謝物。
　　結(jié)果:蜂蟄行為對機(jī)體的刺激大致可以分為蜂毒成分和蟄刺創(chuàng)傷兩方面的刺激，本研究將蜂毒成分和蜇刺創(chuàng)傷視為兩個變量，從代謝組學(xué)角度出發(fā)，研究蜂蟄對大鼠內(nèi)源性代謝的影響，確定了蜂毒成分是影響大鼠內(nèi)源性代

3、謝的主要因素。并探究了受蟄刺大鼠體內(nèi)的代謝規(guī)律，尋找與蜂毒成分相關(guān)的標(biāo)志性差異代謝物和代謝通路。
　　正負(fù)離子模式下分別通過偏最小二乘判別分析(PLS-DA)等方法進(jìn)行建模和統(tǒng)計學(xué)分析后，蜇刺組、創(chuàng)傷組、空白對照組代謝物在PCA得分圖上有顯著趨勢，可以認(rèn)為蜂毒成分、蜜蜂蟄刺行為和蟄刺創(chuàng)傷均對大鼠內(nèi)源性代謝物具有明顯擾動作用。
　　為探究與蜂毒成分相關(guān)的潛在生物標(biāo)志物，對蜇刺組、創(chuàng)傷組進(jìn)行差異代謝物的篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在正負(fù)離子

4、模式下共篩選得到327種差異代謝物。對這些差異代謝物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定和進(jìn)一步篩選，共發(fā)現(xiàn)39個差異代謝物，這些差異代謝物可以被認(rèn)為與蜂毒成分刺激有關(guān)。
　　為探究與完整蜂蜇行為相關(guān)的潛在生物標(biāo)志物，對蜇刺組、創(chuàng)傷組進(jìn)行差異代謝物的篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在正負(fù)離子模式下共篩選得到164種差異代謝物。對這些差異代謝物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定和進(jìn)一步篩選，共發(fā)現(xiàn)71個差異代謝物，這些差異代謝物可以被認(rèn)為與蜂毒成分刺激有關(guān)。
　　為探究與蟄刺創(chuàng)傷相關(guān)的潛

5、在生物標(biāo)志物，對蜇刺組、創(chuàng)傷組進(jìn)行差異代謝物的篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在正負(fù)離子模式下共篩選得到164種差異代謝物。對這些差異代謝物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定和進(jìn)一步篩選，共發(fā)現(xiàn)24個差異代謝物，因此本研究以蜂毒成分對機(jī)體內(nèi)源性代謝的影響為研究重點(diǎn)，確定與蜂毒成分相關(guān)的潛在生物標(biāo)志物，并對代謝通路進(jìn)行推導(dǎo)。
　　為確定最終的生物標(biāo)志物和代謝通路，經(jīng)進(jìn)一步篩選，共得到9個最終差異代謝物，分別為肉毒堿、乙酰肉毒堿、溶血磷脂酰膽堿、溶血磷酸酯、Lyso PC