基于代謝組學(xué)技術(shù)尋找日照綠茶標(biāo)志性代謝物.pdf

1、綠茶是中國(guó)的主要茶類之一，由于其未經(jīng)發(fā)酵，保留了鮮葉的天然物質(zhì)，研究表明，綠茶中含有茶多酚、兒茶素、葉綠素、咖啡堿、氨基酸、維生素等多種營(yíng)養(yǎng)成分，具有提神清心、清熱解暑、降火明目、防衰老、防癌抗癌、抑制心血管疾病等功能。日照綠茶產(chǎn)于山東省日照市，是“南茶北移”成功的范例，有“江北第一茶的美譽(yù)”。受氣候、土壤等條件的影響，由于生長(zhǎng)期長(zhǎng)，晝夜溫差大，光照強(qiáng)度低，漫射光多，日照綠茶各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量較豐富，具有干茶色澤翠綠油潤(rùn),湯色黃綠明亮,

2、栗香濃郁、回味甘醇的特點(diǎn)。但是，市場(chǎng)上綠茶種類繁雜，魚龍混珠的情況嚴(yán)重，而日照綠茶區(qū)別于其他產(chǎn)地茶葉整體的成分變化規(guī)律還不明確，這就需要對(duì)日照綠茶和其他茶葉的化學(xué)組成進(jìn)行系統(tǒng)地分析。本次實(shí)驗(yàn)應(yīng)用基于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（Ultra Liquid chromatography mass spectrometry, UHPLC-MS）的代謝組學(xué)技術(shù)，對(duì)日照綠茶和市場(chǎng)上購(gòu)買的低價(jià)綠茶進(jìn)行了代謝組學(xué)分析。本實(shí)驗(yàn)使用的超高效液相色譜串聯(lián)四極桿-軌道

3、阱高分辨質(zhì)譜的技術(shù)具有分離度高、分辨率高的特點(diǎn)，可以對(duì)茶葉樣本中的物質(zhì)進(jìn)行更精確的測(cè)定。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴建立高效快速的超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法，對(duì)不同茶樹品種、不同產(chǎn)地的日照綠茶和低價(jià)綠茶化學(xué)組成進(jìn)行分析測(cè)定，以便對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析。⑵運(yùn)用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法對(duì)日照綠茶四個(gè)主要產(chǎn)區(qū)（五蓮縣、莒縣、東港區(qū)、嵐山區(qū)）的綠茶樣本進(jìn)行測(cè)定，并運(yùn)用主成分分析和偏最小二乘判別分析對(duì)不同組的樣品進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分

4、析，結(jié)果顯示，日照綠茶在PCA圖上分離度不好，在對(duì)樣本進(jìn)行模型擬合時(shí)，R2X和Q2的值都偏小，模型的預(yù)測(cè)能力和可靠度較低，排列置換檢驗(yàn)的結(jié)果也不理想，所以，我們推論，日照綠茶四個(gè)主要產(chǎn)區(qū)的茶葉樣品沒有很顯著的差異，所以在PCA得分圖上不能明顯分開，在導(dǎo)致在模型擬合時(shí)，沒有提取到可以使不同產(chǎn)地樣本分離的有效的主成分，所以導(dǎo)致了模型的R2X和Q2偏小。⑶運(yùn)用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法對(duì)不同茶樹品種的日照綠茶樣本進(jìn)行測(cè)定，并運(yùn)用主成分分

5、析和偏最小二乘判別分析對(duì)不同組的樣品進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示，在PCA得分圖上，不同茶樹品種的茶葉樣本分布沒有明顯的規(guī)律性，所擬合模型的預(yù)測(cè)能力和可靠度也不理想，所以，我們推論，不同茶樹品種的日照綠茶的差異也不明顯，導(dǎo)致在模型擬合時(shí)無(wú)法提取到使不同樣本分離的有效主成分，進(jìn)而導(dǎo)致了模型擬合不理想的現(xiàn)象。⑷運(yùn)用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法對(duì)日照綠茶和市場(chǎng)上購(gòu)買的低價(jià)綠茶化學(xué)成分進(jìn)行測(cè)定，并運(yùn)用主成分分析和偏最小二乘判別分析對(duì)不同組的樣

6、品進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示，無(wú)論從正譜數(shù)據(jù)還是負(fù)譜數(shù)據(jù)上看，日照綠茶和低價(jià)綠茶間都有明顯差異。兩組樣本在PCA和PLS-DA得分圖上都可以有效分離，所擬合模型的預(yù)測(cè)能力和可靠度都比較高，PCA結(jié)果中，R2的值都大于0.6，PLS-DA結(jié)果中，R2都大于0.9。⑸通過多元統(tǒng)計(jì)技術(shù)，結(jié)合VIP值、p-value、含量等參數(shù)，對(duì)日照綠茶和低價(jià)綠茶兩組樣品中的差異性代謝物進(jìn)行篩選，本實(shí)驗(yàn)選取VIP值大于1、p-value小于0.01、含量比值