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1、目的:益肺活血湯是用于慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者穩(wěn)定期治療的經(jīng)驗(yàn)方劑,具有減輕穩(wěn)定期癥狀,改善運(yùn)動(dòng)耐量和生活質(zhì)量的功效。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)該方劑能夠降低由低氧誘導(dǎo)產(chǎn)生的活性氧(ROS)水平增高,提示其可能具有降低氧化應(yīng)激、增強(qiáng)抗氧化活性的作用。本研究旨在通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)觀察益肺活血湯對(duì)COPD發(fā)病機(jī)制中氧化抗氧化失衡的干預(yù)效應(yīng),并初步探討其作用機(jī)制。
方法:采用SPF級(jí)雄性SD大鼠40只隨機(jī)分為對(duì)照組10只、COPD組15只、益肺
2、活血湯組15只。COPD組采用香煙煙霧吸入聯(lián)合氣管內(nèi)注射LPS法制備大鼠COPD模型同時(shí)給予生理鹽水灌胃。益肺活血湯組在COPD組造模方法的同時(shí)給予益肺活血湯灌胃干預(yù)。對(duì)照組則采用室內(nèi)環(huán)境喂養(yǎng),氣管內(nèi)注射液生理鹽水,同時(shí)給予生理鹽水灌胃。模型復(fù)制和干預(yù)過(guò)程結(jié)束后檢測(cè)各組大鼠肺功能。處死動(dòng)物留取肺組織標(biāo)本,進(jìn)行肺組織切片病理檢查,采用分光光度法檢測(cè)肺組織中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫組化法、
3、蛋白質(zhì)印跡法和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法分別檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子紅細(xì)胞系-2p45(NF-E2)相關(guān)因子-2(nuclear factor erythroid-2p45-related factor2,Nrf2)和V-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的蛋白及mRNA表達(dá)。
結(jié)果: COPD組FEV0.3和FEV0.3/FVC較對(duì)照組顯著降低,而益肺活血湯組FEV0.3和FEV0.3/FVC較COPD組明顯升高。COPD組及益肺活血湯組的肺組織
4、病例切片可見(jiàn)肺泡壁變薄,肺泡腔擴(kuò)大、破裂或形成大泡,細(xì)支氣管壁炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。與對(duì)照組比較,COPD組的肺組織MDA、GSH含量顯著增高,SOD活性顯著下降。與COPD組比較,益肺活血湯組的肺組織MDA、GSH含量顯著下降,SOD活性顯著增高。COPD組NRF2和γ-GCS的蛋白及mRNA表達(dá)均較對(duì)照組明顯增高。而與COPD組比較,益肺活血湯組NRF2和γ-GCS的蛋白及mRNA表達(dá)明顯下降。
結(jié)論:香煙煙霧吸入聯(lián)合氣管內(nèi)注射L
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