辛伐他汀對(duì)慢性阻塞性肺疾病大鼠肺組織IL-17及相關(guān)因子的影響.pdf

1、目的:通過觀察白介素-17（interleukin-17，IL-17）、白介素-21（interleukin-21，IL-21）及轉(zhuǎn)錄因子視黃酸相關(guān)孤兒受體γt(orphan nuclearreceptor gamma t，RORγt)在吸煙導(dǎo)致慢性阻塞性肺疾病(ChronicObstructive Pulmonary Disease，COPD)大鼠肺組織中的表達(dá)，初步探討他汀類藥物在COPD中的作用機(jī)制。
　　方法:
　　

2、1.單純被動(dòng)吸煙建立吸煙大鼠動(dòng)物模型:(1)將36只大鼠隨機(jī)分為三組:對(duì)照組（Control）、吸煙組(Somking)及治療組(Treatment)。除對(duì)照組外，另外兩組大鼠每日在熏煙箱內(nèi)給與煙霧干預(yù)，每日2次，每次吸煙30支，每次吸煙1小時(shí)，日間兩次吸煙間隔4-5小時(shí)，共16周，并同時(shí)給與治療組大鼠辛伐他汀(5mg/kg)灌胃干預(yù)，每日一次。(2)16周后，測(cè)量大鼠體重、計(jì)數(shù)支氣管肺泡灌洗液(bronchveolar lavage

3、fluid，BALF)中白細(xì)胞數(shù)量及分類，并對(duì)肺組織病理形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察。
　　2.采用免疫組化及Real-TimePCR分別對(duì)大鼠肺組織IL-17、IL-21及RORγt蛋白和mRNA的表達(dá)進(jìn)行測(cè)定。
　　結(jié)果:
　　1.實(shí)驗(yàn)前三組大鼠體重?zé)o明顯差異(P＞0.05)。吸煙結(jié)束后，Somking組大鼠及Treatment組大鼠較Control組大鼠體重下降（均P＜0.01），而Somking組大鼠與Treatment組大

4、鼠之間體重?zé)o明顯變化（均P＞0.05）。Somking組BALF各炎癥細(xì)胞數(shù)相對(duì)于Control組明顯增多（均P＜0.01）。內(nèi)襯間隔(pulmonary mean linear intercept，MLI)顯著增加(P＜0.01)，平均肺泡數(shù)(mean alveolar numbers，MAN)顯著降低(P＜0.01)。治療組白細(xì)胞總數(shù)較吸煙組明顯下降(P＜0.01)，中性粒細(xì)胞個(gè)數(shù)及巨噬細(xì)胞個(gè)數(shù)下降(P＜0.01)，吸煙組大鼠與治療

5、組大鼠相比較，平均肺泡數(shù)(meanalveolar numbers)降低(P＜0.01)。內(nèi)襯間隔(MLI)無明顯改變(P＞0.05)。
　　2.免疫組化結(jié)果顯示:在肺泡間隔內(nèi)，IL-17陽(yáng)性細(xì)胞在Control組、Smoking組和Treatment組的表達(dá)分別為:（5.20±4.94）個(gè)/mm2、（90.00±14.02）個(gè)/mm2和（72.80±10.79）個(gè)/mm2; RORγt陽(yáng)性細(xì)胞在Control組、Smoking組

6、和Treatment組的表達(dá)分別為:（6.80±5.85）個(gè)/mm2、(77.27±7.95)個(gè)/mm2和（65.40±5.23）個(gè)/mm2;IL-21陽(yáng)性細(xì)胞在Control組、Smoking組和Treatment組的表達(dá)分別為:（8.20±3.16）個(gè)/mm2、（61.18±9.16）個(gè)/mm2和（49.40±3.34）個(gè)/mm2，三組之間各因子均存在顯著性差異(P＜0.01)。支氣管粘膜上皮內(nèi)，IL-17陽(yáng)性細(xì)胞的百分比在Cont

7、rol組、Smoking組和Treatment組分別為:（8.60±4.84）％、（77.09±6.49）％和（68.80±10.09）％;RORγt陽(yáng)性細(xì)胞的百分比在Control組、Smoking組和Treatment組分別為:（7.60±3.78）％、（79.45±6.80）％和（68.50±10.37）％;IL-21陽(yáng)性細(xì)胞的百分比為:Control組（6.20±5.07）％，Smoking組（58.45±6.56）％，Trea

8、tment組（48.90±4.15）％，三組之間各因子也均存在顯著性差異(P＜0.01)。肺泡間隔內(nèi)的IL-17陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與平均內(nèi)襯間隔(MLI)呈正相關(guān)（r=0.729，P＜0.01），與平均肺泡數(shù)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.889，P＜0.01）。
　　3.熒光定量PCR結(jié)果顯示:肺組織中IL-17mRNA的ΔCT表達(dá)水平在Control組、Somking組和Treatment組分別為(4.78±0.51)、(1.96±0.60)和(

9、3.56±0.15)，三組之間存在明顯差異(P＜0.01);RORγt mRNA的ΔCT表達(dá)水平在Control組、Somking組和Treatment組的分別為(4.69±0.82)、(2.68±0.08)和(3.89±0.21)，三組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）;IL-21mRNA的ΔCT表達(dá)水平在Control組、Somking組和Treatment組的分別為(5.51±0.86)、（1.99±0.61）和（3.59±0.1