脂聯(lián)素在低氧性肺動脈高壓發(fā)生中的作用及其機制研究.pdf

1、目的：低氧性肺動脈高壓為肺動脈高壓中較常見的一種類型，其病因多樣、病情復雜，嚴重時可導致右心衰進而死亡，因此迫切需要闡明其發(fā)病機制，并為其有效預防和治療提供實驗依據(jù)。本研究的目的是觀察重組人球狀脂聯(lián)素（gAd）對低氧性肺動脈高壓（HPH）大鼠離體肺動脈舒張功能的影響，探討脂聯(lián)素（APN）是否改善肺動脈內皮功能，并研究其分子機制。
　　方法：將24只雄性SD大鼠隨機分為正常對照組（Control）、HPH2周組（HPH2W）、HPH

2、4周組（HPH4W），每組8只。正常對照組動物在正常環(huán)境中飼養(yǎng)，低氧組大鼠以間歇性低壓低氧法建立HPH模型。低氧組模型建立后，以右心導管法測定平均肺動脈壓（ mPAP)、平均右心室壓(mRVP)，稱重測量右心室/左心室+室間隔（RV/LV+S）、右心室/體質量（RV/BW）；ELISA檢測試劑盒檢測血清APN及NO濃度。右肺下葉肺組織經HE染色后觀察肺小動脈血管顯微結構的改變。取大鼠左、右肺動脈干制備血管環(huán)，行離體灌流實驗，觀察不同濃度

3、的乙酰膽堿及硝普鈉誘導的血管舒張作用。取HPH4W組動物肺外肺動脈干，分組進行孵育（HPH4W組：Krebs液孵育；HPH4W+gAd組：gAd2μg/ml孵育；HPH4W+ gAd+L-NAME組：gAd2μg/ml+L-NAME0.5 mmol/L孵育），孵育后觀察不同濃度的乙酰膽堿及硝普鈉誘導的血管舒張作用，然后收集作用于血管環(huán)的灌流液，檢測 NO產物。取 HPH4W組大鼠肺動脈血管按上述分組進行孵育，然后行Western blo

4、t檢測AMPK、Akt、eNOS等信號蛋白分子的表達及磷酸化水平。
　　結果：與正常對照組相比，HPH組大鼠的mPAP、mRVP、RV/LV+S、RV/BW均顯著增高（P<0.05）；血清APN、NO水平下降（P<0.05）；光鏡下肺動脈平滑肌及彈力纖維層增生，管壁增厚，管腔狹窄。與正常對照組比較，HPH組大鼠肺動脈對乙酰膽堿誘導的血管舒張作用明顯減弱(P＜0.05)，正常對照組最大舒張率69.9％， HPH2W組最大舒張率48.

5、8%，HPH4W組最大舒張率僅42.1%。經gAd體外孵育后，血管環(huán)內皮依賴的舒張作用明顯增強，HPH4W組最大舒張率可達到46.4%，加入L-NAME組的血管環(huán)舒張作用被顯著阻斷。各組大鼠對硝普鈉誘導的血管舒張均有良好反應，無統(tǒng)計學意義。經gAd孵育后的血管環(huán)組織AMPK、Akt、eNOS磷酸化水平、灌流液NO產物均增加（P<0.05），L-NAME可阻斷gAd增強eNOS磷酸化和NO水平的作用。
　　結論：APN顯著改善間歇性