抑制Transgelin基因預防低氧性肺動脈高壓的研究.pdf

1、背景和目的:
　　低氧性肺動脈高壓是呼吸系統(tǒng)的常見疾病，目前缺乏理想的治療手段，患者預后普遍較差。低氧性肺血管收縮和肺血管重塑是低氧性肺動脈高壓發(fā)病機制中的兩個主要環(huán)節(jié)。肺血管收縮出現(xiàn)在缺氧早期，是一個急性可逆的過程;慢性缺氧則導致難以逆轉的肺血管重塑的發(fā)生。肺血管重塑在低氧性肺動脈高壓的發(fā)病機制中起了十分重要的作用，是目前研究的熱點，其主要表現(xiàn)為肺動脈平滑肌細胞的異常增殖和遷移所致的肺小動脈壁中層增厚及遠端無肌細動脈的肌化。體外

2、研究顯示，低氧通過上調Transgelin的表達，促進肺動脈平滑肌細胞的異常增殖和遷移，從而促進肺血管重塑的發(fā)生。
　　Transgelin是一種肌動蛋白結合蛋白，也是鈣調節(jié)蛋白家族成員之一。人類的Transgelin基因定位于11q23.2，基因全長5.4kb，由5個外顯子和4個內(nèi)含子組成，mRNA全長為1556bp，蛋白分子量為22kD。Transgelin在各物種間廣泛表達，且序列在不同的種屬間具有高度的保守性。在人體的許多

3、組織中均可檢測到Transgelin，其中以平滑肌組織中的含量最高。目前對于Transgelin的功能并不十分清楚，有研究表明其在前列腺癌、乳腺癌和結腸癌的發(fā)生中可能具有抑癌基因的作用，一些研究表明低氧處理后Transgelin的表達水平明顯增高，且當采用siRNA的方法干擾Transgelin的表達后，低氧誘導肺動脈平滑肌細胞的遷移作用明顯降低。這提示Transgelin在低氧下肺血管重塑的發(fā)生中可能起了重要的作用。
　　基于以

4、上分析，我們推測局部抑制Transgelin基因的表達能有效的抑制肺血管重塑，具有治療低氧性肺動脈高壓的潛力。本研究以慢病毒為載體，局部抑制Transgelin基因，觀察其抑制肺血管重塑及緩解肺動脈高壓的作用，以期為低氧性肺動脈高壓的臨床治療提供理論基礎和實驗依據(jù)。
　　方法:
　　構建Transgelin shRNA慢病毒載體，將Transgelin shRNA慢病毒與對照組慢病毒以氣道內(nèi)滴注的方式感染SD大鼠，同時設立常

5、氧對照組。1周后將大鼠分別常氧(21％ O2)及低氧(10％ O2)環(huán)境下飼養(yǎng)，3周后采用右室導管法檢測各組大鼠右心室收縮壓(RVSP)、采用天平稱重法檢測右心室肥厚指數(shù)(RVHI)、以及采用HE染色及免疫組化的方法觀察肺血管重塑指標——肺細小動脈管壁面積/管總面積(WA％)、肺細小動脈管壁厚度(WT％)、肺無肌型小動脈的肌化程度。
　　結果:
　　(1)低氧+對照慢病毒轉染組大鼠的RVSP、RVHI、肺血管重塑指標WT％、

6、WA％和肺無肌型動脈的肌化程度均明顯高于常氧對照組(P＜0.05)。
　　(2)低氧+Transgelin shRNA慢病毒轉染組大鼠的RVSP、RVHI、肺血管重塑指標WT％、WA％和肺無肌型動脈的肌化程度均明顯低于低氧+對照慢病毒轉染組(P＜0.05)。
　　結論:
　　本研究結果表明:以慢病毒為載體，通過氣道內(nèi)滴注的方式將TransgelinshRNA導入大鼠肺組織，可以在肺組織局部下調Transgelin基因的