肝素抑制低氧性肺動脈高壓機制的研究.pdf

1、肝素做為抗凝藥物在臨床應用已有50余年。除了抗凝作用，肝素還有許多其他生物學作用，例如調節(jié)酶類代謝，控制胞外基質中細胞與多種蛋白的結合，結合細胞生長因子等，最近研究發(fā)現肝素能抑制血管平滑肌細胞(smooth musclecell．SMC)的增殖。 細胞的增殖受多種細胞周期調節(jié)因子調節(jié)，P27 是細胞周期依賴性蛋白激酶抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitor，CKI)的一種，．通過抑制周期素依賴

2、性激酶一周期素復合體(Cdk-Cyclin)的活性來調控細胞周期的進程，是G<,1>/S期限制點的重要調控分子。 低氧性肺動脈高壓(hypoxia-induced pulmonary hypertension，HPH)的重要病理特征是肺動脈平滑肌細胞(pulmonary artery smooth muscle cell，PASMC)的增生和肥大。Thompson，Khoury等通過離體和在體實驗研究觀察到肝素可以抑制PASMC

3、的增殖，從而降低HPH的程度，但其機制至今未明。我們假設細胞周期負調控因子P27參與了此過程，本實驗將就此進行初步研究。 材料與方法 一、試驗動物 24只大鼠隨機分為三組，對照組(A組，n=8)，低氧組(B組，n=8)，低氧并肝素干預組(C組，n=8)。將B、C兩組置于常壓低氧艙內，每天連續(xù)低氧8h[氧濃度(10±0.5)％]，連續(xù)2周，C組在每天低氧開始前和結束后分別腹腔注射肝素一次(300u／kg)，A、B兩

4、組在相應時間腹腔注射生理鹽水0.4ml，3組動物飼養(yǎng)及飲食條件相同。 二、右心室收縮壓測定(rignt ventricular systolic pressure．RVSP)低氧兩周后，采用右心導管法，測定RVSP代替肺動脈壓。 三、肺組織標本的取材與制備測定RVSP后，打開胸腔，取一側肺葉用于免疫組織化學法檢測，取另一側肺葉，用于RT-PCR檢測。免疫組化結果用計算機進行灰度掃描分析，RT-PCR結果用目的片斷與內參條

5、帶的吸光度之比值表示。 四、統(tǒng)計學處理數據以均數±標準差表示，用SPSS軟件進行統(tǒng)計學分析，以P<0.05為有統(tǒng)計學意義。 結果 一、右心室收縮壓(RVSP)低氧兩周后，右心導管法測定RVSP。運用成組設計資料樣本均數比較的q檢驗進行組問比較，B組高于A組(P<0.01)，B組高于C組(P<0.01)，c組高于A組(p<0.01)。 二、P27免疫組化結果灰度值比較：B組高于A組(p<0.01)，A組高于