吸入氫氣對慢性低氧性肺動脈高壓的影響.pdf

1、目的：探索吸入氫氣對慢性低氧性肺動脈高壓的影響。
　　方法：(1)動物的分組及缺氧處理：將30只，4-6周大健康雄性清潔級C57小鼠(四川省實驗動物中心)，重量（18-22）g，隨機分為3組：空白對照組（Control）、缺氧組（Hypoxia）、缺氧+氫氣吸入組（Hypoxia+H2）每組10只。空白組不做任何處理；缺氧組予置于氧倉吸入低氧混合氣體（10％O2+90%N2），每天8小時，其余時間置于常氧，持續(xù)28天；缺氧+氫氣吸

2、入組在低氧混合氣體中加入氫氣（10%O2+4%H2+86%N2），其他與缺氧組相同。低氧處理28天后，取組織標本檢查；(2)慢性缺氧模型檢驗：28天缺氧暴露結束后，予3%戊巴比妥鈉（25mg/kg）腹腔注射，氣管插管，頸動脈采血后，即查血常規(guī)，統(tǒng)計三組的紅細胞、血紅蛋白;(3)評估肺動脈高壓（Pulmonary arterial hypertension，PAH）模型：造模完成后，開胸取出心臟組織，分離左右心室并稱重，求得心室肥厚指數(shù)。

3、取同一側同一肺段，4%多聚甲醛固定后，切片，HE染色，使用image processing program6.0測量小血管內外徑，通過心室肥厚指數(shù)和肺微小動脈增生兩項間接指標來反映;(4)肺損傷評估：肺組織HE染色后。使用光學顯微鏡進行觀察，參照Mikawa方法進行肺病理評分;(5)肺組織炎性因子測定：肺組織勻漿后，提取組織液，應用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測。

4、(6)肺組織丙二醛（malondialdehyde，MDA）測定：肺組織勻漿后，提取組織液，定量肺組織MDA。
　　結果：(1)紅細胞、血紅蛋白測定：缺氧組與缺氧+氫氣吸入組紅細胞數(shù)目和血紅蛋白量均增高，符合慢性缺氧血液系統(tǒng)變化，但缺氧組的變化最為顯著;(2)心室肥厚指數(shù)（Right Ventricular Hypertrophy Index，RVHI）和肺血管中膜厚度百分比（Wall thickness percentage，M

5、T%）測定：缺氧組和缺氧+氫氣吸入組與對照組相比，RVHI均增高。缺氧組MT%增高，符合肺動脈高壓的病理學改變，氫氣吸入可改善PAH;(3)肺損傷評估：缺氧組肺病理評分較對照組增高，出現(xiàn)了肺組織間隙的充血和炎細胞的浸潤。缺氧+氫氣吸入組無明顯的肺損傷表現(xiàn);(4)炎性因子和MDA的檢測：Elisa測得腫瘤壞死因子（Turmor necrosis factor-α，TNF-α）和中性粒細胞彈性蛋白酶（Neutrophil elastase，