花生白藜蘆醇合酶基因轉化煙草與番茄的初步研究.pdf

1、本文闡述了白藜蘆醇合酶基因的研究進展，對不同植物來源白藜蘆醇合酶基因的克隆和結構進行比較，分析該基因的誘導和表達特性，并對該基因轉基因植物的性狀進行討論。為了對白藜蘆醇合酶功能進一步研究，本研究擬將白藜蘆醇合酶基因導入煙草和番茄。 本研究以從花生中克隆的白藜蘆醇合酶基因為目的基因，利用植物表達載體pCAMBIA1302，構建了含目的基因的植物重組表達載體pB6RS，并利用電穿孔法將pB6RS質粒直接導入根癌農桿菌LBA4404中

2、。 通過農桿菌介導將pB6RS轉化煙草(云煙85)，得到60株抗性再生植株，通過PCR檢測，有32株呈陽性，目的基因PCR陽性植株的轉化頻率約16％。 以番茄(合作903)子葉為受體材料，確定最佳不定芽分化培養(yǎng)基為MS+1 mg/L6-BA，不定芽分化率為100％，平均不定芽數(shù)為5.6。農桿菌遺傳轉化番茄子葉優(yōu)化條件為外植體無需預培養(yǎng)，農桿菌菌液OD<,600>為0.1左右，浸泡時間為5-10 min，共培養(yǎng)時間為2天。