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文檔簡介
1、實驗?zāi)康模褐|(zhì)體作為一種靶向藥物載體,具有類似細胞的結(jié)構(gòu),在體內(nèi)可以改變被包封藥物的分布,并具有緩釋效果,從而減少藥物的劑量和降低藥物的毒性,提高藥物的治療指數(shù),為提高本實驗室已合成的新化合物茶氯香酰胺(TClC)的溶解性,增加其在體內(nèi)外藥效和提高生物利用度,本研究賦予其脂質(zhì)體劑型(TClC-L)。此外,為進一步提高腫瘤抑制作用,實驗設(shè)計茶氯香酰胺與順鉑聯(lián)合應(yīng)用。鑒于順鉑(DDP)屬周期非特異性抗癌藥,抗瘤譜較廣,但在體內(nèi)的毒性較大,為
2、進一步提高其抗腫瘤活性,本研究還制備了茶氯香酰胺與順鉑復(fù)方脂質(zhì)體(TClC+DDP-L),評估了DDP-L(順鉑脂質(zhì)體)和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞生長和遷移的影響,探索了它們作用的分子機制。
實驗方法:
1.采用薄膜分散法方法分別制備TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L,對制備的脂質(zhì)體處方工藝進行了研究和質(zhì)量評價;
2.通過MTT法檢測TClC-L,DDP-L和 TClC+
3、DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞生長的影響;
3.使用流式細胞術(shù)檢測TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞凋亡的影響;
4.用Transwellchamber法觀察TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞遷移的影響;
5.應(yīng)用蛋白印跡技術(shù)檢測TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞中與生長和遷移相關(guān)的蛋白的表
4、達影響,并研究了藥物可能作用的分子機制;
實驗結(jié)果:
1.得到了TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L,脂質(zhì)體質(zhì)量評估符合實驗要求。
2. MTT結(jié)果表明:三種脂質(zhì)體 TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L對人乳腺癌MCF-7細胞的生長均表現(xiàn)出抑制作用,同劑量下細胞給藥TClC+DDP-L抑制作用更加顯著,并呈現(xiàn)出顯著的劑量—時間依賴關(guān)系。
3.流式細胞術(shù)分析顯示:三種脂質(zhì)體T
5、ClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L均可促進人乳腺癌MCF-7細胞發(fā)生凋亡。
4.Transwellchamber檢測結(jié)果表明:三種脂質(zhì)體TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L均可以降低人乳腺癌MCF-7細胞的遷移能力。
5.蛋白印跡法結(jié)果表明:三種脂質(zhì)體TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L均能夠上調(diào)抑制生長和誘導(dǎo)凋亡的相關(guān)蛋白因子Bax、PARP-1和caspase-3的表達水平,下
6、調(diào)促進生長和遷移以及抗凋亡的相關(guān)蛋白因子 VEGFR1、VEGFR2、Bcl-2、Akt和ER-α蛋白的表達水平。
實驗結(jié)論: TClC-L,DDP-L和 TClC+DDP-L均對人乳腺癌MCF-7細胞的生長和遷移有顯著的抑制作用,TClC+DDP-L的抑制作用最強;促進腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞生長和遷移可能是其作用重要的分子機制,其中涉及到的蛋白因子包括Bcl-2、Bax、PARP-1、caspase-3、VEGFR1、V
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