茶氯香酰胺脂質(zhì)體的制備及抗乳腺癌活性的研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模褐|(zhì)體作為一種靶向藥物載體，具有類(lèi)似細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，在體內(nèi)可以改變被包封藥物的分布，并具有緩釋效果，從而減少藥物的劑量和降低藥物的毒性，提高藥物的治療指數(shù)，為提高本實(shí)驗(yàn)室已合成的新化合物茶氯香酰胺(TClC)的溶解性，增加其在體內(nèi)外藥效和提高生物利用度，本研究賦予其脂質(zhì)體劑型(TClC-L)。此外，為進(jìn)一步提高腫瘤抑制作用，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)茶氯香酰胺與順鉑聯(lián)合應(yīng)用。鑒于順鉑(DDP)屬周期非特異性抗癌藥，抗瘤譜較廣，但在體內(nèi)的毒性較大，為

2、進(jìn)一步提高其抗腫瘤活性，本研究還制備了茶氯香酰胺與順鉑復(fù)方脂質(zhì)體（TClC+DDP-L），評(píng)估了DDP-L（順鉑脂質(zhì)體）和 TClC+DDP-L對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)和遷移的影響，探索了它們作用的分子機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　1.采用薄膜分散法方法分別制備TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L，對(duì)制備的脂質(zhì)體處方工藝進(jìn)行了研究和質(zhì)量評(píng)價(jià)；
　　2.通過(guò)MTT法檢測(cè)TClC-L，DDP-L和 TClC+

3、DDP-L對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)的影響；
　　3.使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡的影響；
　　4.用Transwellchamber法觀(guān)察TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞遷移的影響；
　　5.應(yīng)用蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞中與生長(zhǎng)和遷移相關(guān)的蛋白的表

4、達(dá)影響，并研究了藥物可能作用的分子機(jī)制；
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.得到了TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L，脂質(zhì)體質(zhì)量評(píng)估符合實(shí)驗(yàn)要求。
　　2. MTT結(jié)果表明：三種脂質(zhì)體 TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)均表現(xiàn)出抑制作用，同劑量下細(xì)胞給藥TClC+DDP-L抑制作用更加顯著，并呈現(xiàn)出顯著的劑量—時(shí)間依賴(lài)關(guān)系。
　　3.流式細(xì)胞術(shù)分析顯示：三種脂質(zhì)體T

5、ClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均可促進(jìn)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞發(fā)生凋亡。
　　4.Transwellchamber檢測(cè)結(jié)果表明：三種脂質(zhì)體TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均可以降低人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的遷移能力。
　　5.蛋白印跡法結(jié)果表明：三種脂質(zhì)體TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均能夠上調(diào)抑制生長(zhǎng)和誘導(dǎo)凋亡的相關(guān)蛋白因子Bax、PARP-1和caspase-3的表達(dá)水平，下

6、調(diào)促進(jìn)生長(zhǎng)和遷移以及抗凋亡的相關(guān)蛋白因子 VEGFR1、VEGFR2、Bcl-2、Akt和ER-α蛋白的表達(dá)水平。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)論： TClC-L，DDP-L和 TClC+DDP-L均對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移有顯著的抑制作用，TClC+DDP-L的抑制作用最強(qiáng)；促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和遷移可能是其作用重要的分子機(jī)制，其中涉及到的蛋白因子包括Bcl-2、Bax、PARP-1、caspase-3、VEGFR1、V