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文檔簡介
1、目的:構建大鼠失血性休克復蘇肝臟缺血再灌注損傷模型,用免疫組化方法探討TNF-α、NF-κβ在肝臟缺血再灌注損傷中的作用。
方法:30只清潔級SD大鼠被隨機分為假手術組(A組)、休克組(B組)、失血性休克/復蘇(C組)亦稱模型組。A組大鼠麻醉后,測平均動脈壓(MAP)正常后直接處死采集大鼠肝組織。B組經股動脈穿刺置管放血,維持MAP為(35±5mmHg)持續(xù) 90min后處死采集大鼠肝組織。C組大鼠麻醉后,經股動脈穿刺置管
2、放血,維持MAP為(35±5mmHg)維持90min,回輸自體血液進行復蘇,維持MAP 80-100mmHg,制作失血性休克復蘇模型,復蘇6h后處死采集大鼠肝組織。通過HE染色了解肝組織病理形態(tài)學改變, SP免疫組化測定各組大鼠肝臟TNF-α、NF-κβ表達情況,并采用全自動圖像分析系統(Image-proplus 6.0)計算各組陽性區(qū)域積分吸光度。應用SPSS統計軟件進行數據處理,計量資料用均數±標準差(±S)表示,成組資料采用單因
3、素方差分析,進行方差齊性檢驗,各組間相互比較采用t檢驗。以P<0.05為差異具有統計學意義。
結果:A組HE染色肝組織結構及形態(tài)正常,B組見部分肝細胞空泡樣變性,損傷較輕,C組肝組織損傷較最重,肝小葉結構不清,肝細胞出現明顯的空泡變性,肝竇淤血,并見大量中性粒細胞滲出及肝臟巨噬細胞聚集。免疫組化結果顯示:C組表達TNF-α、NF-κβ最高,二者平均積分吸光度值分別為(0.197±0.026,0.131±0.035);B組的
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