扶正消瘀散結(jié)方對(duì)Ⅲ、Ⅳ期前列腺癌療效及其作用機(jī)制研究.pdf

1、前列腺癌(Prostatic carcinoma Pca)是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，發(fā)病率呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，隨著社會(huì)老齡化進(jìn)程加劇，老年男性前列腺癌的發(fā)病率將進(jìn)一步上升，增加了社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，降低了患者的生活質(zhì)量。前列腺癌的臨床表現(xiàn)主要有:膀胱出口梗阻癥狀、局部浸潤(rùn)癥狀、轉(zhuǎn)移性癥狀。
　　前列腺癌的診斷有賴(lài)于早期的篩查，很多前列腺癌患者一經(jīng)發(fā)現(xiàn)已經(jīng)失去手術(shù)時(shí)機(jī)，部分前列腺癌是經(jīng)體檢異常后的穿刺活檢發(fā)現(xiàn)的。前列腺癌的治療主要有

2、手術(shù)治療和非手術(shù)治療，對(duì)于Ⅲ、Ⅳ期前列腺癌病人的治療主要采用非手術(shù)治療，因?yàn)椴∪艘呀?jīng)失去手術(shù)時(shí)機(jī)或者難以耐受手術(shù)。
　　目前認(rèn)為前列腺癌的發(fā)病主要和年齡、遺傳、飲食、生活習(xí)慣、微量元素的攝入、以及雄激素水平等方面因素有關(guān)。然而并沒(méi)有足夠的證據(jù)證實(shí)其關(guān)系的必然性，對(duì)于其具體的發(fā)病機(jī)制也還處于研究階段，尚無(wú)定論。
　　祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為本病屬于中醫(yī)“癃閉”“尿血”“積聚”“瘕瘕”等范疇。我院泌尿外科謝建興、陳銘教授在長(zhǎng)期的臨床中緊緊抓

3、住正氣虛損，氣滯血瘀日久而成癥瘕的主要病機(jī)，在扶助正氣的基礎(chǔ)上應(yīng)用活血化瘀，清熱解毒，消瘀散結(jié)中藥擬成扶正消瘀散結(jié)方來(lái)治療前列腺癌，該方組方精簡(jiǎn)，攻補(bǔ)兼施，標(biāo)本兼治，制方嚴(yán)謹(jǐn)，經(jīng)過(guò)多年的臨床驗(yàn)證，療效確切，但尚缺乏系統(tǒng)的臨床與實(shí)驗(yàn)研究。
　　目的：
　　本課題通過(guò)臨床和實(shí)驗(yàn)兩個(gè)方面研究扶正消瘀散結(jié)方的療效，旨在系統(tǒng)全面評(píng)價(jià)扶正消瘀散結(jié)方治療前列腺癌的臨床療效，并深入腫瘤細(xì)胞水平探索扶正消瘀散結(jié)方抑制腫瘤，促進(jìn)前列腺癌細(xì)凋亡的

4、機(jī)制。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)研究
　　將正常裸鼠隨機(jī)分為2組:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組10只，前列腺癌PC3細(xì)胞裸鼠皮下接種造模成功后給予實(shí)驗(yàn)組扶正消瘀散結(jié)方藥灌胃30天，每天2次，每次0.4ml（0.2ml/10g體重），對(duì)照組給予等量生理鹽水。成瘤達(dá)實(shí)驗(yàn)要求后每6天測(cè)量移植瘤體積，計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)抑制率，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后剖瘤稱(chēng)重;AnnexinⅤ-FITC/PI雙染后流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)移植瘤內(nèi)Bcl-

5、2和Bax蛋白的表達(dá);Western blot法檢測(cè)PTEN蛋白表達(dá)。
　　2.臨床觀察
　　本實(shí)驗(yàn)所觀察的所有患者均來(lái)自2013年10月-2015年10月就診于廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿男科門(mén)診及泌尿外科病房的病人，共納入臨床病人60例。分為治療組、對(duì)照組，每組各30例。治療組采用扶正消瘀散結(jié)方藥聯(lián)合西醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)分泌治療，對(duì)照組采用單純西醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)分泌治療。密切觀察并隨訪兩組病人3個(gè)月，從前列腺特異性抗原(tPSA)，血清

6、睪酮(T)，血紅蛋白(Hb)，中醫(yī)證候評(píng)分量表(ZYZH)，Karnofsky功能狀態(tài)評(píng)分，晚期前列腺癌患者生活質(zhì)量評(píng)估FACT-P4.0評(píng)分等方面進(jìn)行比較，治療后1、3個(gè)月進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　結(jié)果：
　　1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　(1)裸鼠皮下移植瘤造模結(jié)果:實(shí)驗(yàn)用20只裸鼠在接種后7天左右見(jiàn)接種部位有淡紅色皮丘凸起，大小呈粟粒樣，7天至14天的移植瘤逐漸增大，至2周左右皮下可見(jiàn)明顯腫瘤團(tuán)塊，凸起于皮下，邊界清楚，質(zhì)韌，測(cè)量長(zhǎng)

7、徑均已超過(guò)7mm，各裸鼠接種后生長(zhǎng)情況良好，無(wú)精神萎靡、消瘦、死亡。
　　(2)腫瘤的生長(zhǎng)變化過(guò)程:藥物灌胃治療過(guò)程中裸鼠未出現(xiàn)死亡，生長(zhǎng)良好，無(wú)明顯腹脹表現(xiàn)，無(wú)毒副反應(yīng)，瘤體生長(zhǎng)過(guò)程中未見(jiàn)缺血、壞死，結(jié)癡。治療結(jié)束后實(shí)驗(yàn)組裸鼠腫瘤質(zhì)量及腫瘤體積明顯低于對(duì)照組，抑瘤率為21.1％。
　　(3)從FITC和PI熒光雙參數(shù)點(diǎn)圖觀察到，活細(xì)胞主要分布在LL區(qū)，因操作等原因引起的機(jī)械性死亡細(xì)胞(UL區(qū))數(shù)量非常少。LR區(qū)凋亡細(xì)胞比值

8、實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組。
　　(4)免疫組織化學(xué)法結(jié)果顯示Bax、Bcl-2定位于腫瘤細(xì)胞的胞漿中，呈棕黃色顆粒。實(shí)驗(yàn)組Bax的OD值高于對(duì)照組，Bcl-2的OD值低于對(duì)照組。扶正消瘀散結(jié)方組較對(duì)照組能夠促進(jìn)前列腺癌PC-3細(xì)胞Bax蛋白的表達(dá)，抑制Bcl-2蛋白的表達(dá)。
　　(5) WB法檢測(cè)PTEN蛋白的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組PTEN/β-actin值高于對(duì)照組，扶正消瘀散結(jié)方能升高PTEN/β-actin比值，提高PTEN蛋白的表

9、達(dá)量。
　　2.臨床結(jié)果:
　　與治療前比較，治療組比對(duì)照組能更有效的降低PSA水平;治療組能更有效地降低睪酮水平，且兩組并未隨治療時(shí)間的延長(zhǎng)而獲得更有效降低睪酮的作用;治療組能明顯升高血紅蛋白水平，對(duì)照組血紅蛋白下降，且兩組隨治療時(shí)間的延長(zhǎng)未見(jiàn)差別。
　　中醫(yī)癥狀評(píng)分結(jié)果:治療組能更有效降低中醫(yī)癥狀評(píng)分，對(duì)照組在治療早期中醫(yī)癥狀評(píng)分不降反升，可能和早期病人對(duì)西藥副作用的反應(yīng)過(guò)于敏感所致。從卡氏評(píng)分變化看:治療組比對(duì)照

10、組能更有效的升高卡氏評(píng)分。生理狀態(tài)評(píng)分:治療組能更有效的降低生理狀態(tài)評(píng)分，且隨用藥時(shí)間的延長(zhǎng)作用明顯，對(duì)照組治療隨時(shí)間的延長(zhǎng)沒(méi)有明顯變化。社會(huì)家庭狀況:治療組能更好的升高社會(huì)家庭狀態(tài)評(píng)分，且隨用藥時(shí)間延長(zhǎng)效果顯著;對(duì)照組用藥早期未見(jiàn)明顯作用。情感狀況:治療組能更有效的降低情感狀態(tài)評(píng)分，且隨用藥時(shí)間的延長(zhǎng)作用明顯，對(duì)照組用藥早期未見(jiàn)明顯作用。功能狀況:治療組比對(duì)照組能更有效的升高功能狀態(tài)評(píng)分，可見(jiàn)扶正消瘀散結(jié)方在改善功能狀態(tài)方面作用明顯。

11、附加關(guān)注:治療組可以在3個(gè)月時(shí)升高附加關(guān)注評(píng)分，對(duì)照組對(duì)附加關(guān)注評(píng)分無(wú)影響，其可能是因?yàn)楦郊釉u(píng)分內(nèi)各單項(xiàng)的評(píng)價(jià)分?jǐn)?shù)升降趨勢(shì)不同有關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.實(shí)驗(yàn)結(jié)論
　　扶正消瘀散結(jié)方可以有效抑制裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)，促進(jìn)前列腺癌PC-3細(xì)胞的凋亡，其對(duì)細(xì)胞凋亡的作用可能是通過(guò)上調(diào)Bax蛋白的表達(dá)，下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)提高PTEN蛋白的表達(dá)量來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
　　2.臨床結(jié)論
　　扶正消瘀散結(jié)方聯(lián)合內(nèi)分泌治療前列腺