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1、目的:應(yīng)用Southern雜交技術(shù),對皮肽、肌肉端粒DNA片斷長度(mean length of telomere restriction fragment,簡稱:TRF)進行觀察,測定不同年齡段人群的端粒DNA片斷長度值,以期初步探明不同年齡段人群的端粒DNA片斷長度的變化規(guī)律,繪制出端粒DNA片斷長度值隨年齡變化的標(biāo)準(zhǔn)曲線,比較性別、籍貫對端粒DNA片斷長度的影響,以期為法醫(yī)實踐工作中對無名尸體年齡推斷提供理論依據(jù).方法:采用Sou
2、thern雜交的方法.隨機取60名無關(guān)個體的皮膚、71名無關(guān)個體的肌肉,用蛋白酶K消化樣本,酚、氯仿法抽提出DNA,測出DNA的濃度,用地高辛標(biāo)記探針并確定探針最適工作濃度,Hinf Ⅰ酶消化DNA,瓊脂糖凝焦電泳分離DNA片斷后,行真空轉(zhuǎn)膜,洗膜,進行Southern雜交,BCIP/NBT法染色顯色后,進行圖像分析,得出不同年齡段供體的端粒DNA片斷長度值.結(jié)論:皮膚、肌肉的端粒DNA片斷長度隨著年齡的增加而逐漸縮短,其隨年齡縮短的速
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