利用牛肉組織端粒長度推斷個(gè)體年齡的初步研究.pdf

1、瘋牛病即牛海綿狀腦病(BSE)，其發(fā)病期與年齡密切相關(guān)，潛伏期長達(dá)2-8年，發(fā)病年齡多為4-6歲，2歲以下和6歲以上的牛很少發(fā)生。目前普遍認(rèn)為，瘋牛病的致病機(jī)理是由正常朊蛋白(PrPc)轉(zhuǎn)化為異常構(gòu)象阮蛋白(PrPsc)所致。在瘋牛病潛伏期內(nèi)，其肌肉等非傳染性組織尚未發(fā)生病變，甚至其傳染性組織如腦和脊髓的朊蛋白也處于正常情況。因此，24月齡以下的牛肉對消費(fèi)者來說是相對安全的。一旦由于政治因素，撤消了對瘋牛病低風(fēng)險(xiǎn)國家的進(jìn)口禁令，我們可以

2、通過限制24月齡以上的牛肉進(jìn)口來有效阻止瘋牛病進(jìn)入中國。 端粒是真核生物染色體末端的特殊結(jié)構(gòu)，與細(xì)胞衰老有著密切的聯(lián)系。大量試驗(yàn)證明：隨著年齡的增長和體細(xì)胞有絲分裂次數(shù)增加，端粒重復(fù)序列逐步丟失，從而導(dǎo)致端粒長度逐漸縮短。因此端粒長度的縮短已經(jīng)成為細(xì)胞衰老和年齡增長的生物學(xué)標(biāo)志之一，可以在一定程度上反映生物個(gè)體的年齡水平。 本試驗(yàn)應(yīng)用southern雜交技術(shù)，測定取自不同部位、品種、性別及年齡的130個(gè)牛肉組織的端粒長度

3、，以期探明牛肉端粒長度與其取樣部位、品種、性別、年齡之間的關(guān)系，從而建立起牛肉端粒長度與年齡的回歸方程，為利用牛肉組織端粒長度推斷個(gè)體年齡提供技術(shù)支持。本試驗(yàn)進(jìn)行了四個(gè)分試驗(yàn)，得到以下幾點(diǎn)結(jié)論： (1)通過對56日齡的西門塔爾公犢的脖子、前腿、肩部、肋骨、后腿，臀部等不同部位樣品的端粒長度測定，發(fā)現(xiàn)其各部位的端粒長度值沒有顯著差異(P>0.05)。表明取樣部位不同對牛肉端粒長度影響不顯著。 (2)通過對12到36月齡5個(gè)

4、年齡段的魯西黃牛和利木贊牛公牛個(gè)體進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在相同的年齡階段，這兩個(gè)品種牛的端粒長度沒有顯著差異(P>0.05)。說明品種的差異對牛肉端粒長度影響不顯著。 (3)通過對魯西黃牛和利木贊牛兩個(gè)品種18月齡的公、母個(gè)體的研究，發(fā)現(xiàn)這一年齡段，兩個(gè)品種的公、母牛個(gè)體的端粒長度存在極顯著的差異(P<0.01)，表明性別差異對于牛肉端粒長度具有極顯著影響，母牛擁有比公牛更長的端粒。 (4)由于性別差異對牛肉端粒長度影響極為顯著

5、，而取樣部位和品種對端粒長度沒有顯著影響。因此本試驗(yàn)選擇公牛樣本進(jìn)行年齡和端粒長度的回歸分析，通過對56日齡到72月齡的西門塔爾、魯西黃牛、利木贊牛樣品中公牛的端粒長度的研究，發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增長，端粒長度逐漸縮短。36月齡之前，端粒長度隨年齡的增長縮短的較快，以后縮短速度逐漸變慢，其縮短程度呈現(xiàn)出不均衡性。依據(jù)分析結(jié)果建立端粒長度與年齡的回歸方程：Y公=-1.5854ln(X)+19.556，相關(guān)系數(shù)R2=0.9784。其中X表示個(gè)體的

6、年齡，Y表示對應(yīng)的端粒DNA片段長度值。 本試驗(yàn)結(jié)果表明：對于來自不同品種和取樣部位的牛肉樣品，我們可以用同一回歸模型進(jìn)行其年齡推斷研究；而對于來自不同性別個(gè)體的樣品，我們必須區(qū)別公母個(gè)體分別加以研究：端粒長度隨年齡增長不斷縮短這一特性，使其在個(gè)體年齡推斷方面的應(yīng)用成為一種可能。本試驗(yàn)已證明了36月齡之前，端粒長度縮短程度是極為顯著的，這一不均衡性就讓我們在24月齡以內(nèi)的個(gè)體年齡推斷研究中具有更大的精確性，有利于對瘋牛病潛伏期的