糖尿病患者外周血白細(xì)胞端粒長度與端粒酶活性變換的研究.pdf

1、背景：糖尿病是一種以高血糖為病理特征的代謝性疾病，若體內(nèi)長期維持高血糖狀態(tài)會引起一系列的并發(fā)癥，例如：腎臟、肝臟、心臟、血管、眼等的損傷，對人體健康產(chǎn)生非常嚴(yán)重的影響。糖尿病的發(fā)病率也呈逐年上升狀態(tài)，并且，全球沒有非常有效的醫(yī)療手段治愈此類疾病。糖尿病患病初始沒有任何表征，當(dāng)病人到醫(yī)院就診時，大部分胰島細(xì)胞已經(jīng)失去功能，只能依靠藥物維持血糖平衡。糖尿病早期發(fā)現(xiàn)、早期治療成為當(dāng)今的一項研究熱點，通過分子生物學(xué)手段對外周血白細(xì)胞端粒長度與端

2、粒酶活性進行檢測以探討白細(xì)胞端粒長度變化、端粒酶活性變化與糖尿病的相關(guān)性。
　　方法：提取30例1型糖尿?。═1DM）、60例2型糖尿?。═2DM）、40例2型伴動脈硬化糖尿病（DAS）患者外周血白細(xì)胞基因組 DNA，利用實時熒光定量PCR的方法檢測基因組DNA的端粒長度，以36B4基因作為對照，檢測不同分型糖尿病間以及糖尿病患者與正常健康人間的端粒長度變化情況。從而探究糖尿病對人類外周血白細(xì)胞端粒長度的影響；利用多元線性回歸分析

3、探究影響端粒長度的具體因素。分別提取40例T1DM患者、80例T2DM患者的外周血白細(xì)胞與血漿，利用TRAP-PCR的方法檢測白細(xì)胞與血漿中是否存在端粒酶活性；再利用熒光定量 PCR的方法檢測端粒酶的活性；從而探究糖尿病對外周血白細(xì)胞、血漿的端粒酶活性影響情況，利用多元線性回歸分析探究影響端粒酶活性的主要因素。
　　結(jié)果：建立了檢測端粒長度與端粒酶活性的可靠辦法。T1DM、T2DM、DAS患者外周血白細(xì)胞端粒長度均小于健康對照（N

4、C）組；在不同分型的糖尿病對比中T1DM組端粒長度短于T2DM組與DAS組，DAS組比T2DM組更短。通過多元線性回歸分析得到：在 T1DM組中，年齡與白細(xì)胞端粒長度呈負(fù)相關(guān)；T2DM組中，年齡、BMI與白細(xì)胞端粒長度呈負(fù)相關(guān)；DAS組中，BMI、患病時間與端粒長度呈負(fù)相關(guān)。在糖尿病患者外周血白細(xì)胞、血漿的端粒酶活性檢測試驗中，根據(jù)TRAP-PCR與RT-qPCR的結(jié)果顯示，在T1DM組、T2DM組與NC組中的外周血血漿中并沒有發(fā)現(xiàn)端粒

5、酶活性。在外周血白細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)了端粒酶活性，T1DM患者的外周血白細(xì)胞端粒酶活性與T2DM患者均顯著高于NC組的；并且T1DM患者的端粒酶活性高于T2DM患者。多元線性回歸分析顯示：在T2DM組中，性別與吸煙狀況與白細(xì)胞端粒酶活性有顯著相關(guān)性，得到男性與吸煙患者的白細(xì)胞端粒酶活性強于女性與不吸煙者。
　　結(jié)論：糖尿病患者的外周血白細(xì)胞端粒長度明顯短于正常人，并且 T1DM患者的端粒長度顯著短于 T2DM；在2型糖尿病的對比中，DA

6、S患者的端粒長度明顯短于 T2DM?；颊叩哪挲g、患病時間、BMI值與端粒長度的縮短有密切的關(guān)系。在T1DM與T2DM患者的外周血血漿中都沒有發(fā)現(xiàn)端粒酶活性存在。T1DM與T2DM患者的外周血白細(xì)胞端粒酶活性顯著高于正常人；并且，T1DM患者的白細(xì)胞端粒酶活性高于T2DM患者。在T2DM組中發(fā)現(xiàn)性別與吸煙狀況與白細(xì)胞端粒酶活性有顯著相關(guān)性。糖尿病對于外周血白細(xì)胞的端粒長度、端粒酶活性均有明顯影響；對于二者的相關(guān)檢查可能對于糖尿病的早發(fā)現(xiàn)、