口腔頜面部惡性腫瘤端粒長度的研究.pdf

1、浙江大學碩士學位論文口腔頜面部惡性腫瘤端粒長度的研究姓名：張寅申請學位級別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學指導教師：平飛云2000.5.1及手術切緣組織。其中有原發(fā)腫瘤16例，復發(fā)腫瘤4例；有淋巴結轉移者8例，無淋巴結轉移者12例。采用DNASouthern雜交法檢測上述組織的平均端粒長度。組織標本中加入DNA裂解液，經蛋白酶K消化，剛傳統(tǒng)的酚一氯仿法提取DNA。用分光光度法測定DNA濃度和純度。由于人類端粒重復序列(TTAGGG)。內部無限制

2、性內切酶Hinfl的酶切位點，所以我們用Hinfl來消化基因組DNA。酶切后的DNA用^DNA／HindIII作為分子量標記，在08％瓊脂糖凝膠中電泳分離。電泳產物經變性、中和后，用Southern轉印法轉移到尼龍膜上。用【Y”P】ATP標記端粒寡核苷酸探針的5’端，標記體系與尼龍膜在雜交管中于37“C預雜交、雜交。經放射白顯影后，對膠片進行光密度掃描分析，取掃描主峰位置與分子量標記比較后，得出平均末端限制片斷(terminalrest

3、rictionfragments，TRFs)，作為平均端粒長度。本研究結果顯示：20例口腔頜面部惡性腫瘤的平均端粒長度為53653038kb，瘤旁正常組織的平均端粒長度為96651862kb，兩者相差為43003350kb，差別具有顯著性(P(001)。其中16例口腔頜面部惡性腫瘤的端粒較瘤旁正常組織明顯縮短，2例腫瘤組織的端粒長度無明顯變化，而另2例腫瘤組織端粒則有所延長。結果支持了“端粒一端粒酶一腫瘤發(fā)生”的假說。同時我們還發(fā)現(xiàn)有6