丹參多酚酸鹽對健康人及冠心病患者血小板聚集的影響.pdf

1、目的：隨著社會發(fā)展和人們生活水平的不斷提高，冠心病的發(fā)病率與死亡率逐年升高，并呈現(xiàn)年輕化的趨勢，嚴重威脅著人們的生命健康。而血小板活化后粘附、聚集在冠心病的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。因此抗血小板已成為治療冠心病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。臨床常用檢測血小板聚集率的方法來觀察藥物療效。
　　目前，環(huán)氧合酶抑制劑阿司匹林、二磷酸腺苷(ADP)受體拮抗劑氯吡格雷、GPⅡ bⅢa受體拮抗劑替羅非班等藥物已在抗血小板治療中取得了很好的效果，但我國的中藥如丹

2、參、銀杏、川芎、紅花等，也越來越受到人們的廣泛關(guān)注。隨著科研儀器及技術(shù)的不斷發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)了眾多中藥提取物，在冠心病的治療中起著重要作用。目前受到最多關(guān)注的是較純化的水溶性丹參提取物一丹參多酚酸鹽。一些實驗表明丹參多酚酸鹽具有抗氧化、抑制低密度脂蛋白的氧化修飾作用、抑制胞間連接、抑制金屬蛋白酶的表達、抗炎等作用，對抗動脈粥樣硬化，保護心腦血管。還有一些研究表明丹參多酚酸鹽可以降低P選擇素，改善血小板一氧化氮合酶(eNOS)的活性，降低冠

3、心病患者ADP及腎上腺素(EP)誘導(dǎo)的血小板聚集率。但目前這些研究均為體內(nèi)試驗，存在混雜因素不易控制等缺陷，丹參多酚酸鹽的抗血小板聚集作用及其機制并未得到確切證實。本課題通過將26例健康人全血、8例冠心病患者全血及26例健康人血小板原漿分別與不同濃度的丹參多酚酸鹽體外孵育，通過檢測血小板聚集率與聚集斜率，觀察丹參多酚酸鹽是否有抗血小板作用，為臨床丹參多酚酸鹽的使用提供客觀依據(jù)。
　　材料：實驗對象分三部分。①健康人全血組。共26例

4、，其中男性9例，女性17例，年齡15～64歲(36.08±14.19)歲。入選標準：肝腎功能正常、血常規(guī)正常、女性處于非月經(jīng)期的健康人。②冠心病患者全血組。共8例患者，其中男性5例，女性3例，年齡51～78歲(62.13±8.27)歲。入選標準：為急性冠脈綜合征(ACS)患者，包括ST段抬高型心肌梗死患者、非ST段抬高型心肌梗死患者及不穩(wěn)定型心絞痛患者。兩組的排除標準：各種血液病，出血性疾病，或有出血傾向；近1周使用過阿司匹林、氯吡格雷

5、、肝素等抗血小板、抗凝藥物。③健康人血小板原漿組。共26份新鮮機采健康人血小板原漿，血小板濃度約為1280×109L。其納入標準及排除標準均嚴格按照國家獻血法的標準。
　　方法：對健康人及冠心病人全血組受試對象于肘靜脈或股靜脈采集血標本，采血后各自制備成空白對照組、丹參多酚酸鹽終濃度分別為1mg/L、10mg/L、100mg/L的實驗組(C0-3組)，于1小時內(nèi)用全血電阻抗法檢測血小板聚集率及斜率。健康人血小板原漿組在血小板采集后

6、1小時內(nèi)用同上方法測血小板聚集率及斜率。誘導(dǎo)劑為二磷酸腺苷(ADP)(10μmol/L)、花生四烯酸(AA)(0.5μmol/L)及EP(1mg/mL)。數(shù)據(jù)采用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析。計量資料服從正態(tài)分布時用均數(shù)±標準差(x-±s)表示，不服從正態(tài)分布時采用中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示，即M(QR)。正態(tài)分布時采用單因素方差分析，不服從正態(tài)分布時組間比較采用多個相關(guān)樣本的秩和檢驗。P<0.05認為有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果：<

7、br>　　1不同濃度的丹參多酚酸鹽對健康人全血血小板聚集的影響
　　1.1 ADP(10μmol/L)誘導(dǎo)血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為7.00(5.00)ohms，7.04±3.17 ohms，7.00±3.73 ohms，7.12±4.71 ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.923)。聚集斜率分別為4.00(3.00)ohms/min，4.00(4.00)ohms/min，4.00(5.00)ohms/min，

8、4.00(5.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.252)。
　　1.2 AA(0.5μmol/L)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為10.65±3.53 ohms，11.19±4.20 ohms，12.00(4.00)ohms，12.08±3.70 ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.096)。聚集斜率分別為6.50(5.00)ohms/min，6.81±2.93 ohms/min，7.42±3.2

9、5 ohms/min，7.77±3.87 ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.296)。
　　1.3 EP(1mg/ml)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為6.26±4.45 ohms，5.00(8.00)ohms，5.42±3.20 ohms，8.95±5.10 ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.157)。聚集斜率分別為2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min，2.00

10、(1.00)ohms/min，3.00(2.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.405)。
　　2不同濃度的丹參多酚酸鹽對冠心病患者全血血小板聚集的影響
　　2.1 ADP(10μmol/L)誘導(dǎo)血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為3.50(8.00)ohms，3.50(5.00)ohms，4.63±3.34 ohms，3.88±3.44 ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.546)。聚集斜率分別為2.

11、00(3.00)ohms/min，2.00(3.00)ohms/min，3.50±1.31 ohms/min，2.00(2.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.071)。
　　2.2 AA(0.5μmol/L)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為7.25±4.06 ohms，6.88±4.05 ohms，8.00(3.00)ohms，7.75±4.43 ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.919)。聚集

12、斜率分別為4.88±2.03 ohms/min，4.50±2.33 ohms/min，4.00±1.60 ohms/min，4.63±2.07 ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.850)。
　　2.3 EP(1mg/ml)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為3.50(5.00)ohms，3.50(4.00)ohms，1.50(3.00)ohms，1.50(5.00)ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.312

13、)。聚集斜率分別為2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.896)。
　　3不同濃度的丹參多酚酸鹽對健康人血小板原漿組血小板聚集的影響
　　3.1 ADP(10μmol/L)誘導(dǎo)血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為16.65±2.74 ohms，15.50(2.00)ohms，15

14、.65±3.15 ohms，15.50(3.00)ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.503)。聚集斜率分別為31.85±4.84ohms/min，32.00(6.00)ohms/min，30.50(5.00)ohms/min，31.27±6.11ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.454)。
　　3.2 AA(0.5μmol/L)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為16.50±2.96 ohms，15.65

15、±2.02 ohms，16.58±2.64 ohms，16.96±2.31ohms。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.293)。聚集斜率分別為37.69±5.06ohms/min，39.00±4.99 ohms/min，37.42±4.93 ohms/min，40.08±3.65ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.155)。
　　3.3 EP(1mg/ml)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為19.92±3.54 o

16、hms，17.50±2.79 ohms，17.08±2.71 ohms，17.12±3.50 ohms。差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)對照組與三組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義，而丹參多酚酸鹽低、中、高濃度組間無統(tǒng)計學(xué)差異。聚集斜率分別為25.15±4.92 ohms/min，24.23±5.06 ohms/min，24.54±6.38 ohms/min，25.19±4.86 ohms/min。差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P

17、=0.894)。
　　結(jié)論：本研究通過全血電阻抗法檢測三組實驗對象的血小板聚集率及聚集斜率，發(fā)現(xiàn)在健康人及冠心病人全血中，低、中、高濃度的丹參多酚酸鹽均不能拮抗ADP、AA及EP誘導(dǎo)的血小板聚集率，亦不能降低血小板聚集斜率。只有在血小板濃度約為1280×109/L的血小板原漿組中，丹參多酚酸鹽能夠降低EP誘導(dǎo)的血小板聚集率，但不同濃度的丹參多酚酸鹽組之間沒有差別。同時在高濃度的血小板原漿組中，丹參多酚酸鹽不能降低ADP及AA誘導(dǎo)的