當歸四逆湯加減方對大鼠糖尿病神經病變的作用及機制研究.pdf

1、目的:糖尿病神經病變(Diabetic neuropathy，DN)是糖尿病常見的并發(fā)癥之一。我們以往的研究發(fā)現(xiàn)當歸四逆湯加減方(Danggui sini Decoction，DSD)能夠緩解糖尿病神經病變引起的疼痛。本實驗擬觀察當歸四逆湯加減方(DSD)對糖尿病大鼠坐骨神經和脊髓中一氧化氮(nitric oxide，NO)、一氧化氮合酶(Inducednitric oxide synthase，NOS)、抗氧化酶、凋亡相關蛋白和硝基酪

2、氨酸(nitrotyrosine，NT)蛋白和對后肢爪墊表皮內神經纖維影響。
　　方法:鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)誘導SD大鼠1型糖尿病模型。分為正常對照組，糖尿病組，當歸四逆湯加減方(DSD)治療組。當歸四逆湯加減方灌胃12周。檢測大鼠體重和血糖，測量大鼠尾長、身長和尾根周長。運用免疫組織化學法檢測大鼠坐骨神經誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxidesynthase，iNOS)、神

3、經型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）、S-100（雪旺細胞標志性蛋白）和硝基酪氨酸（nitrotyrosine，NT，硝化應激的標志性蛋白）表達和使用PGP9.5（Protein gene product9.5，神經纖維標記物）抗體檢測后肢爪墊表皮內神經纖維。運用RT-PCR實驗方法檢測脊髓中誘導型一氧化氮合酶，抗氧化酶(Mn-SOD，Cu-Zn-SOD)，凋亡相關蛋白(Bcl-2，

4、Bax)mRNA表達情況。使用總NO檢測試劑盒檢測脊髓中總NO量。
　　結果:與對照組相比，糖尿病組大鼠坐骨神經iNOS和NT蛋白表達顯著升高(p＜0.05)，脊髓中iNOS，Mn-SOD，Cu-Zn-SOD mRNA表達顯著升高(p＜0.05)，Bcl-2/Bax mRNA表達顯著降低(p＜0.05)，后肢爪墊表皮內神經纖維面積顯著減少(p＜0.05);與糖尿病組相比，DSD組大鼠坐骨神經iNOS和NT蛋白表達顯著降低(p＜0.

5、05);DSD組脊髓中iNOS，Mn-SOD，Cu-Zn-SODmRNA水平表達顯著降低(p＜0.05);后肢爪墊表皮內神經纖維面積顯著增加(p＜0.05)。與糖尿病組相比，DSD組大鼠體重和血糖沒有顯著變化(p＞0.05)。
　　結論:DSD能夠降低糖尿病大鼠坐骨神經iNOS和NT蛋白水平的高表達;降低脊髓中iNOS，Mn-SOD，Cu-Zn-SOD mRNA水平的高表達，升高脊髓中總NO的量;部分逆轉糖尿病大鼠后肢爪墊表皮內神