點(diǎn)陣Er-YAG激光(2940nm)對兔耳增生性瘢痕不同時(shí)期膠原重塑的影響.pdf

1、目的：點(diǎn)陣激光已成功應(yīng)用于淺表性瘢痕的治療，但對增生性瘢痕的治療鮮有報(bào)導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)采用點(diǎn)陣Er：YAG激光(2940nm)照射兔耳增生性瘢痕，通過觀察各實(shí)驗(yàn)組瘢痕組織的膠原纖維分布特征以及Ⅰ、Ⅲ型膠原構(gòu)成比例的變化情況，探討其對增生性瘢痕的治療效果以及不同時(shí)期治療效果的區(qū)別，從而為臨床點(diǎn)陣激光治療增生性瘢痕提供理論依據(jù)。
　　方法：同種屬新西蘭大白兔6只，雄性，體重2.0±0.18kg，在每只兔耳腹側(cè)面中段，使用圓形環(huán)鉆沿長軸避開血

2、管，各做4個直徑為6mm的圓形全層皮膚缺損創(chuàng)面，各創(chuàng)面間隔1.0cm，深達(dá)軟骨表面，并刮去軟骨膜，共形成48個圓形創(chuàng)面。將兔耳增生性瘢痕塊隨機(jī)分為六組，行激光治療和對照：
　?、僭錾谥委熃M(n=8)：造模后30天(增生期)行點(diǎn)陣鉺激光照射治療。激光治療參數(shù)：能量密度162 J/cm2，重復(fù)掃描5次。激光治療術(shù)后22天取材。
　?、谠錾趯φ战M(n=8)：作為①組空白對照不做治療，與①組同時(shí)取材。
　　③消退期治療組(

3、n=8)：造模后60天(消退期)行點(diǎn)陣鉺激光照射治療。治療參數(shù)、取材時(shí)間同①組。
　?、芟似趯φ战M(n=8)：作為③組空白對照不做治療，與③組同時(shí)取材。
　?、莩墒炱谥委熃M(n=8)：造模后90天(成熟期)行點(diǎn)陣鉺激光照射治療。治療參數(shù)、取材時(shí)間同①組。
　?、蕹墒炱趯φ战M(n=8)：作為⑤組空白對照不做治療，與⑤組同時(shí)取材。
　　對標(biāo)本脫水浸蠟石蠟包埋，進(jìn)行組織切片，厚度為5μm。采用HE、Masson和天狼

4、猩紅染色觀察各實(shí)驗(yàn)組兔耳增生性瘢痕組織中膠原纖維分布特征；采用苦味酸--天狼猩紅偏振光法及圖像分析技術(shù)測定各實(shí)驗(yàn)組兔耳增生性瘢痕組織中Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維的構(gòu)成比例。二者用于反映點(diǎn)陣激光治療增生性瘢痕的效果。
　　統(tǒng)計(jì)各實(shí)驗(yàn)組兔耳增生性瘢痕組織中Ⅲ型膠原所占比例，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。應(yīng)用SAS8.0進(jìn)行完全隨機(jī)分組兩因素析因設(shè)計(jì)與方差分析，以p<0.05作為判斷差異顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1組織形態(tài)學(xué)變化

5、>　　增生期：
　　對照組：瘢痕組織突出于皮膚表面，色紅，質(zhì)硬，范圍在原術(shù)野內(nèi)，光鏡下見微血管增生，膠原纖維大量增生，外形粗大，排列紊亂，有旋渦狀結(jié)構(gòu)。
　　治療組：瘢痕組織較對照組顏色變淺、質(zhì)地稍軟，光鏡下見瘢痕組織膠原纖維較對照組顏色變淺，纖維變細(xì)，膠原排列有序。
　　消退期：
　　對照組：瘢痕有所萎縮，但仍高于皮膚表面，顏色變淡，質(zhì)較硬，光鏡下見微血管減少，膠原纖維粗大，較增生期密集，排列進(jìn)一步紊亂，膠原結(jié)

6、節(jié)少見。
　　治療組：瘢痕組織較對照組顏色變淡、質(zhì)軟且彈性增加，光鏡下見瘢痕組織膠原纖維較對照組顏色變淺，纖維變細(xì)，膠原排列較疏散、規(guī)則。
　　成熟期：
　　對照組：瘢痕明顯萎縮，較平坦，中心部分顏色變白，質(zhì)較周圍正常皮膚硬。光鏡下見微血管少，膠原纖維較消退期變細(xì)，排列更紊亂、密集，無膠原結(jié)節(jié)。
　　治療組：瘢痕組織的顏色、質(zhì)地較對照組有所改善，接近與周圍正常皮膚。光鏡下見膠原纖維排列疏散并趨于一致。
　　

7、2偏光顯微鏡觀察與圖象分析
　　增生期對照組瘢痕組織中，黃色粗大的Ⅰ型膠原纖維呈叢束狀分布，排列紊亂，密度不均，大約占整個視野的56％，纖細(xì)綠色的Ⅲ型膠原纖維呈網(wǎng)疏狀分布于Ⅰ型膠原周圍，約占44％；治療組膠原纖維排列較對照組有序，Ⅲ型膠原所占比例增加，約占47％。消退期對照組瘢痕組織中，大量粗大的Ⅰ型膠原纖維，聚集成塊狀，排列進(jìn)一步紊亂，約占整個視野的82％，Ⅲ型膠原所占比例低于18％；治療組膠原纖維排列較對照組疏散、規(guī)則，Ⅲ型膠

8、原纖維所占比例較對照組明顯增加，約占30％。成熟期對照組瘢痕組織中Ⅰ型膠原纖維呈竹節(jié)狀，排列更加紊亂，約占93％以上，Ⅲ型膠原所占比例低于7％；治療組膠原纖維排列較對照組疏散并趨于一致，Ⅲ型膠原纖維所占比例較對照組顯著增加，約占24％。
　　3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　對各組標(biāo)本Ⅲ型膠原所占比例進(jìn)行兩因素多水平的析因分析，結(jié)果表明：增生性瘢痕不同時(shí)期，Ⅲ型膠原所占比例不同(F=135.933，P=0.000＜0.01)；點(diǎn)陣鉺激光治療

9、可以增加瘢痕組織中Ⅲ型膠原所占比例(F=52.476，P=0.000＜0.01)；增加程度與瘢痕接受治療時(shí)期有關(guān)(F=6.355，P=0.004＜0.01)，增生期較對照組增加(3％)＜消退期(12％)＜成熟期(17％)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果認(rèn)為：點(diǎn)陣Er：YAG激光(2940nm)對兔耳增生性瘢痕治療效果的明顯程度依次為增生期＜消退期＜成熟期。
　　結(jié)論：
　　1點(diǎn)陣Er：YAG激光(2940nm)治療后，瘢痕組織中膠原纖維的形