粉紋夜蛾細胞對Bt Cry1Ac毒素的抗性特點及其機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis,簡稱Bt)合成的殺蟲晶體蛋白或轉(zhuǎn)Bt基因植物表達的毒素蛋白對多種害蟲具有特異性毒殺作用，本文選擇篩選抗性昆蟲培養(yǎng)細胞作為研究材料，以揭示昆蟲的Bt抗性特點及其機制。本文研究以MTT法檢測了粉紋夜蛾(Trichoplusia ni)胚胎細胞系BTI-TN-5B1-4(簡稱TnH5或Hi5)對Cry1Ac的抗性發(fā)展及其規(guī)律，以ELISA、配體印跡和熒光標記法比較了敏感

2、和抗性兩種細胞與Cry1Ac毒素的結(jié)合，克隆了兩個類氨肽酶N基因的cDNA片斷并測定了敏感和抗性兩種細胞的氨肽酶和堿性磷酸酶的相對活力，以mRNA差異顯示法和蛋白質(zhì)組學技術(shù)研究了敏感和抗性兩種細胞差異表達的mRNA和特異的蛋白質(zhì)，并據(jù)此探討了抗性產(chǎn)生的機制。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，昆蟲離體細胞Bt抗性特點與抗性昆蟲的類似，它非常便于開展抗性分子機制的研究，可作為揭示昆蟲Bt抗性機制的另一獨特材料。從實驗結(jié)果推測TnH5細胞的BtCry1Ac選擇抗

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