粉紋夜蛾細(xì)胞對Bt Cry1Ac毒素的抗性特點(diǎn)及其機(jī)制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis,簡稱Bt)合成的殺蟲晶體蛋白或轉(zhuǎn)Bt基因植物表達(dá)的毒素蛋白對多種害蟲具有特異性毒殺作用，本文選擇篩選抗性昆蟲培養(yǎng)細(xì)胞作為研究材料，以揭示昆蟲的Bt抗性特點(diǎn)及其機(jī)制。本文研究以MTT法檢測了粉紋夜蛾(Trichoplusia ni)胚胎細(xì)胞系BTI-TN-5B1-4(簡稱TnH5或Hi5)對Cry1Ac的抗性發(fā)展及其規(guī)律，以ELISA、配體印跡和熒光標(biāo)記法比較了敏感

2、和抗性兩種細(xì)胞與Cry1Ac毒素的結(jié)合，克隆了兩個(gè)類氨肽酶N基因的cDNA片斷并測定了敏感和抗性兩種細(xì)胞的氨肽酶和堿性磷酸酶的相對活力，以mRNA差異顯示法和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究了敏感和抗性兩種細(xì)胞差異表達(dá)的mRNA和特異的蛋白質(zhì)，并據(jù)此探討了抗性產(chǎn)生的機(jī)制。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，昆蟲離體細(xì)胞Bt抗性特點(diǎn)與抗性昆蟲的類似，它非常便于開展抗性分子機(jī)制的研究，可作為揭示昆蟲Bt抗性機(jī)制的另一獨(dú)特材料。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測TnH5細(xì)胞的BtCry1Ac選擇抗

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