廣西10例人芽囊原蟲基因型和同工酶譜的研究.pdf

1、目的：觀察廣西10例人芽囊原蟲分離株基因型及其蘋果酸脫氫酶(MDH，EC1.1.1.37)、堿性磷酸酶(ALP,EC.3.1.3.1)、乳酸脫氫酶(LDH，EC.1.1.1.27)和酯酶(EST，EC.3.1.1.1)的同工酶譜特征，為人芽囊原蟲分類學(xué)研究提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：從感染者糞便中分離人芽囊原蟲，體外培養(yǎng)，純化蟲體，提取基因組DNA。用已知的7對特異性STS引物對基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增來鑒定基因型；分別收集各

2、分離株的蟲體制備同工酶電泳樣品，采取不連續(xù)性聚丙烯酰胺凝膠垂直板狀電泳方法分離，特異性底物染色，以相對遷移率標(biāo)記酶帶。
　　 結(jié)果：10例人芽囊原蟲分離株中有8例在應(yīng)用SB83引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增后出現(xiàn)特異性的陽性條帶，可確定為基因1型。另外2例分離株經(jīng)7對引物擴(kuò)增均為陰性，為未知基因型。
　　 10例人芽囊原蟲分離株在MDH酶譜中，共出現(xiàn)7條酶帶，常見的酶帶有Pm34，Rm47，Rm51、Pm55和Rm59，10例分離株

3、完全一致的酶帶有Rm34和Rm51；在ALP酶譜中共出現(xiàn)5條酶帶Rm22、Rm25、Rm28、Pm35和Rm38；在LDH酶譜中，共出現(xiàn)10條酶帶，常見的酶帶有Rm37和Pm92；在EST酶譜中共出現(xiàn)12條酶帶。
　　 結(jié)論：首次對廣西的人芽囊原蟲進(jìn)行基因分型的研究，發(fā)現(xiàn)廣西存在基因1型和未知基因型。
　　 同工酶譜可以反映人芽囊原蟲的遺傳差異，與基因分型的結(jié)果具有一致性，可為人芽囊原蟲基因分型提供有力佐證。