基于組學(xué)方法及Lc-MS技術(shù)的兩種蒙藥（森登-4和丹參）作用機(jī)制研究.pdf

1、本研究結(jié)合基于組學(xué)方法及LC-MS技術(shù)分別研究了蒙藥森登-4治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制以及蒙藥丹參中的丹參多酚酸鹽治療擴(kuò)張性心肌病的作用機(jī)制。
　　首先，探究蒙藥復(fù)方森登-4的配伍機(jī)制。蒙藥文冠木與梔子、川楝子、訶子以5∶3∶1∶1的比例配伍后得到蒙藥復(fù)方森登-4;配伍前后的樣品采用WatersAcquity BEH-C18柱(50 mm×2.1 mm，1.7μm)為色譜柱，0.1％甲酸水溶液-甲醇為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，柱溫40℃

2、，體積流量0.4 mL/min，迸樣量10μL;并將UPLC-MS技術(shù)與主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)相結(jié)合，對(duì)蒙藥復(fù)方森登-4配伍前后組方中君藥文冠木主要化學(xué)成分變化情況進(jìn)行了分析。在PCA與OPLS-DA模型中，文冠木與復(fù)方森登-4均可明顯得到區(qū)分;配伍后8個(gè)化合物在兩組間存在顯著差異(P＜0.05)，其中兒茶素、沒(méi)食子兒茶素、雙氫楊梅素、槲皮素的溶出量在配伍后下降，而xanthocerasic ac

3、id、3β-hydroxytirucalla-7,24-dien-21-oic acid、3-oxotirucalla-7,24-dien-21-oicacid、蘆丁的溶出量升高。蒙藥復(fù)方森登-4的抗炎及抗風(fēng)濕活性可能與其中的君藥文冠木配伍之后某些指標(biāo)成分的溶出量變化有一定關(guān)系。
　　其次，以傳統(tǒng)蒙藥方森登-4治療佐劑誘導(dǎo)的類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。將UPLC-MS技術(shù)與主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)相結(jié)合用來(lái)

4、區(qū)分正常組、模型組、森登-4治療組的代謝輪廓，并尋找潛在的生物標(biāo)記物。在PCA與OPLS-DA模型中，三組大鼠的代謝輪廓可以明顯區(qū)分。利用OPLS-DA方法找到了13個(gè)潛在的生物標(biāo)記物，它們分別是二十二酰胺，溶血磷脂酰乙醇胺，鳥(niǎo)苷磷酸腺苷，依那普利拉，強(qiáng)啡肽B(6-9)，磷酯酰絲氨酸，5'-鳥(niǎo)苷（二磷酸），二十二碳六烯酸，α-生育三烯酚，維生素D3-23羧酸，三磷酸尿苷，R）-3-羥基-棕櫚酸，二十七酸。蒙藥方森登-4可能通過(guò)影響這些生

5、物標(biāo)記物的代謝通路從而達(dá)到抑制類(lèi)風(fēng)濕大鼠組織病理學(xué)改變的目的。
　　最后，將代謝組學(xué)與分子生物學(xué)方法相結(jié)合，研究丹參多酚酸鹽治療擴(kuò)張性心肌病的作用機(jī)制。采用主成分分析(PCA)法，分析了健康組、模型組、丹參多酚酸鹽給藥組的大鼠血清代謝輪廓，采用正交校正的偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)法尋找潛在的生物標(biāo)記物，經(jīng)鑒定，共得到磷酯酰絲氨酸(16∶0/18∶1(9Z))、溶血磷脂(16∶0)、溶血磷脂(20∶4(5Z，8Z，11Z，

6、14Z))、溶血磷脂(22∶6(4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z))、膽固醇硫酸酯、膽汁酸、γ-亞麻酸、二十二碳五烯酸、9'-羧基-γ-生育酚9種潛在的生物標(biāo)記物。其中，γ-亞麻酸、二十二碳五烯酸、9'-羧基-γ-生育酚的含量在模型組中下降，經(jīng)丹參多酚酸鹽治療后含量上升。通過(guò)Western bloting法與酶聯(lián)免疫吸附法證實(shí)丹參多酚酸鹽通過(guò)影響體內(nèi)與γ-亞麻酸、9'-羧基-γ-生育酚相關(guān)的超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(M