Th17細胞及相關(guān)因子在穩(wěn)定期慢性阻塞性肺疾病患者肺部的表達及意義.pdf

1、第一部分肺功能正常吸煙者和慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中白細胞介素17的表達及意義
　　 目的：探討白細胞介素17(IL-17)在肺功能正常吸煙者和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺部炎癥反應(yīng)發(fā)生機制中的作用。
　　 方法：將需手術(shù)治療的周圍型肺癌患者分為肺功能正常非吸煙組(NS組，10例)、肺功能正常吸煙組(S組，13例)、吸煙COPD穩(wěn)定期組(COPD組，10例)。于手術(shù)切除標本選取距肺癌病灶5～8cm處的新鮮正常肺組

2、織，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELASA)檢測各組肺組織勻漿IL-17含量，HE和維多利亞藍+范吉遜染色檢測各組平均肺泡面積、小氣道總病理積分和肺腺泡肌型動脈(MA)管壁厚度，免疫組織化學(xué)方法檢測IL-17+及CD4+、CD8+T細胞在肺泡壁、小氣道壁及MA管壁的表達，分析IL-17表達與CD4+、CD8+T細胞以及與肺實質(zhì)病理改變和肺功能指標的相關(guān)關(guān)系。
　　 結(jié)果：（略）
　　 結(jié)論：IL-17在肺功能正常吸煙者和COPD患

3、者肺組織中表達增高，與肺CD4+、CD8+T細胞及肺組織破壞、氣道炎癥、肺動脈重構(gòu)和氣流受限密切相關(guān)，提示IL-17在吸煙者和COPD患者肺部炎癥反應(yīng)發(fā)生機制中有促炎作用。
　　 第二部分輔助T細胞17在肺功能正常吸煙者及COPD患者肺部組織中的活化、分布及作用
　　 目的：觀察肺功能正常吸煙者和COPD患者肺組織是否存在活化的輔助T細胞(Th)17即CD4+IL-17+細胞，其活化程度以及與IL-17之間的相關(guān)關(guān)系，探

4、討肺實質(zhì)中IL-17是否來源于Th17細胞。分析CD4+IL-17+細胞在肺部的表達及分布并與肺部病理、肺功能指標改變之間做相關(guān)分析關(guān)系，探討Th17細胞在COPD炎癥反應(yīng)中的作用。
　　 方法：實驗病例入選及分組同第一章。熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)方法檢測肺組織勻漿Th17細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORgammat(維甲酸相關(guān)孤獨受體γt)的RNA表達水平，蛋白質(zhì)印跡(Westermblot)方法檢測肺組織勻漿RORgamma

5、t蛋白表達水平，免疫熒光雙標方法檢測Th17細胞在肺泡壁、小氣道壁、肺小動脈壁的表達。分析肺組織勻漿中RORgammatRNA表達水平與IL-17蛋白水平及FEV1占預(yù)計值百分比相關(guān)性；分析肺組織中Th17細胞與肺氣腫、小氣道病理總積分、肺小動脈管壁厚度，及與IL-17+、CD4+T淋巴細胞之間相關(guān)性。
　　 結(jié)果：（略）
　　 結(jié)論：Th17細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORgammatmRNA及蛋白水平在正常吸煙者的肺組織已經(jīng)

6、開始增高，COPD患者更為顯著，并與IL-17蛋白含量密切相關(guān)；Th17細胞表達增強并與IL-17+細胞、CD4+T淋巴細胞及肺組織破壞、氣道和肺動脈炎癥與重構(gòu)、氣流受限密切相關(guān)。結(jié)果提示CD4+T淋巴細胞參與吸煙者和COPD患者肺部炎癥免疫反應(yīng)，肺組織中Th17處于增殖活化狀態(tài)，并分泌IL-17參與并促進肺部炎癥反應(yīng)。
　　 第三部分Th17細胞及相關(guān)因子參與肺功能正常吸煙者和COPD患者肺部炎癥的相關(guān)機制
　　 目的

7、:觀察Th17細胞活化的上游因子IL-23受體(IL-23R)，CC趨化因子受體6(CCR6)及其分泌的相關(guān)因子IL-17、IL-21在肺組織的表達及意義，探討Th17細胞在COPD肺部炎癥中活化及放大炎癥反應(yīng)的可能機制。
　　 方法:實驗病例入選及分組同第一章。肺組織蠟塊病理切片免疫組化技術(shù)檢測肺泡壁1L-17，IL-23R，CCR6的表達，并分析三者之間及與Th17細胞之間的相關(guān)性。熒光定量PCR檢測肺組織勻漿IL-21mR

8、NA、1L-17mRNA含量，并分析二者之間，以及與RORγtmRNA和FEV1的相關(guān)關(guān)系。分析肺泡壁、氣道壁、肺動脈壁Th17細胞與CD8+T細胞的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：（略）
　　 結(jié)論：肺功能正常吸煙者和COPD患者肺泡壁中IL-17、IL-23R、CCR6表達顯著增高并與Th17細胞數(shù)呈顯著正相關(guān)，在肺泡壁、氣道、肺動脈中Th17細胞數(shù)與CD8+淋巴細胞均有顯著正相關(guān)，Th17細胞相關(guān)因子IL-21、1L-17在