桑枝降糖活性成分及協(xié)同作用研究.pdf

1、糖尿病是一種危害人類健康的常見和多發(fā)病，隨著人類生存環(huán)境和生活方式的改變，糖尿病患者的數(shù)量在世界范圍內(nèi)急劇增長，糖尿病已成為繼心血管病、腫瘤之后的第三大病種，成為危害21世紀(jì)人類健康的殺手。如何防治糖尿病是世界范圍內(nèi)的重大研究課題，研發(fā)治療糖尿病的藥物受到人類高度重視。目前臨床治療糖尿病主要依靠注射各種胰島素和口服降糖藥物，但其會產(chǎn)生很多副作用，而且治療費(fèi)用很高，給人們帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。我國糖尿病的中醫(yī)藥治療有著悠久的歷史，治療效果

2、顯著。所以從傳統(tǒng)中藥中研發(fā)高效、毒副作用小的降糖藥物已成為一個熱點(diǎn)課題。桑科植物MorusalbaL桑枝(RamulusMokD被認(rèn)為是治療糖尿病的傳統(tǒng)常用中藥?，F(xiàn)代研究表明，桑枝具有降脂、降壓、增加機(jī)體耐力、抗衰老、降低膽固醇、抑制血栓形成，抑制腸內(nèi)有害細(xì)菌繁殖，抑制有害氧化物形成，抑制癌癥以及調(diào)節(jié)腎上腺素功能等功效，但最突出的功能是緩解糖尿病。本論文以α-葡萄糖苷酶為體外研究靶點(diǎn)，以正常小鼠鏈佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的糖尿病小鼠為體內(nèi)研

3、究對象，探求桑枝水提物降糖活性，研究的主要內(nèi)容有:
　　 (1)本研究以α-葡萄糖苷酶為靶點(diǎn)篩選桑樹不同部位水提物（桑葉、桑枝、桑白皮）中活性高的部位，結(jié)果顯示三者對α-葡萄糖苷酶活性均有較好的抑制作用。比較其中，桑白皮的抑制率最高(IC50=0.27mg/mL)，桑枝次之，桑葉稍差。在前期的動物預(yù)實(shí)驗(yàn)中，三者也都能降低小鼠（正常和糖尿?。┎秃笱撬?。結(jié)合其他因素，如桑枝到每年的11月份都會被大量打掉，使得桑枝資源豐富，相比桑

4、白皮似乎更容易在生產(chǎn)上實(shí)現(xiàn)規(guī)模化。所以采用了桑枝作為實(shí)驗(yàn)室研究原材料。
　　 (2)本研究建立了實(shí)驗(yàn)室水平的桑枝總生物堿，總多糖，總黃酮的提取工藝，以α-葡萄糖苷酶為靶點(diǎn)從桑枝生藥中利用大孔樹脂交換、陽離子交換樹脂吸附、醇沉、硅膠吸附及重結(jié)晶等方法制備了三種不同組分的提取物及其單體，利用化學(xué)分析法對這三種提取物的主要化學(xué)成分進(jìn)行了分析，得出三種組分主要分別是生物堿，多糖和黃酮。
　　 (3)從桑枝水提物中制備的三種活性組

5、分及其代表性單體化合物（多糖、DNJ、蘆?。┰隗w外檢測了對α-葡萄糖苷酶的作用，得出其對酶活性的抑制能力為生物堿(DNJ)＞黃酮（蘆丁）＞多糖類（多糖），尤其是DNJ對α-葡萄糖苷酶的抑制活性很強(qiáng)，而多糖則顯示很弱的酶抑制活性。各組單體化合物在體內(nèi)水平均可降低正常小鼠的餐后血糖水平，延緩血糖高峰的時間。在給藥30min后，給藥組與空白對照組相比，血糖值有顯著差異(P＜0.05或P＜0.01);研究單體化合物對實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠的餐后血糖水

6、平影響時，給藥組與空白對照組相比，餐后血糖值以DNJ組極顯著下降(P＜0.01)，蘆丁和多糖組也有顯著差異(P＜0.05)。
　　 (4)桑枝中主要降糖活性成分DNJ與蘆丁及多糖類單體組成的復(fù)方混合物在體外酶學(xué)水平實(shí)驗(yàn)中，對α-葡萄糖苷酶的抑制效果均優(yōu)于單獨(dú)組分。在正常小鼠和實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠的糖耐量實(shí)驗(yàn)中，給藥30min后復(fù)方組與單體DNJ組相比，血糖值有顯著差異(P＜0.05)。證明DNJ與蘆丁和多糖類物質(zhì)配伍有良好的協(xié)同作用