微小RNA-124在急性創(chuàng)傷性脊髓損傷診治中的應(yīng)用研究.pdf

1、背景：
　　脊髓損傷（英文全稱(chēng)為spinalcordinjury，一般簡(jiǎn)寫(xiě)作SCI）是一類(lèi)由各種致病因素導(dǎo)致脊髓組織受損，主要以軀體損傷平面以的下感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)有限或全部功能障礙等為其臨床表現(xiàn)，并且多伴隨大小便失禁。它屬于中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的范疇。構(gòu)成脊髓損傷的原因多種多樣：臨床上主要有相關(guān)病毒的感染，侵及脊髓的膿毒癥，脊髓組織的良惡性占位性病變，機(jī)體其他的系統(tǒng)性病變導(dǎo)致的脊髓組織缺血缺氧或內(nèi)環(huán)境紊亂等。但是臨床上最多見(jiàn)的還是由于各種外

2、力所導(dǎo)致的脊髓組織急性損傷。從解剖學(xué)上講，脊髓組織位于堅(jiān)固的骨性脊柱組織和堅(jiān)韌且緊密聯(lián)結(jié)的結(jié)締組織層層包繞之中，而且處于軀干的中軸部位，平素難以受到外力的直接作用。唯有較高能量的外界暴力，通過(guò)破壞脊髓組織周?chē)墓切越Y(jié)構(gòu)或者堅(jiān)韌的韌帶組織，才可能對(duì)脊髓組織本身造成有效的打擊。近年來(lái)，隨著交通運(yùn)輸事業(yè)的高速發(fā)展，以及以房地產(chǎn)業(yè)為首的建筑行業(yè)的長(zhǎng)足進(jìn)步，再加上安全駕駛、安全生產(chǎn)等安全意識(shí)淡薄，這些經(jīng)濟(jì)社會(huì)的深刻變化為急性創(chuàng)傷性脊髓損傷患者的增

3、長(zhǎng)提供了溫床。過(guò)去一般認(rèn)為無(wú)論何種原因造成的脊髓損傷，其過(guò)程都是不可逆的，也就是說(shuō)脊髓組織很難恢復(fù)到損傷前的狀態(tài)，這就造成了脊髓損傷患者極為痛苦的預(yù)后。其兼具直接的致殘性和間接的致死性，缺乏最基礎(chǔ)的生活質(zhì)量，而且要極大的拖累患者的家庭，造成家庭成員生活質(zhì)量的同步下降，相對(duì)于其他的創(chuàng)傷，將成倍的消耗社會(huì)資源。誠(chéng)然，經(jīng)過(guò)了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)一百余年的發(fā)展，針對(duì)脊髓損傷，尤其是創(chuàng)傷性脊髓損傷已經(jīng)出現(xiàn)了各種各樣的診療技術(shù)，但是其干預(yù)手段總是滯后的，在臨床

4、實(shí)踐中，對(duì)于脊髓損傷的診斷，除主觀(guān)性較強(qiáng)的體格檢查外，要極端的依賴(lài)影像學(xué)，尤其是磁共振，神經(jīng)電生理等的應(yīng)用，人類(lèi)第一次可以在術(shù)前了解到患者脊髓組織的損傷情況。古人云：尺有所短，寸有所長(zhǎng)，磁共振及神經(jīng)電生理檢查本身具有很大的局限性，費(fèi)時(shí)長(zhǎng)，費(fèi)用高，需要患者有較高的配合性，在中心性醫(yī)院才能開(kāi)展此項(xiàng)檢查，大多機(jī)構(gòu)并非24小時(shí)應(yīng)診，不能有效客觀(guān)的識(shí)別脊髓組織的損傷程度，僅能進(jìn)行范圍性的概覽等等。而現(xiàn)代比較成熟的治療手段要求我們要進(jìn)行早期的內(nèi)外科

5、干預(yù)。這就要求我們有一種獲取便捷而準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室客觀(guān)指標(biāo)，用于急性創(chuàng)傷性脊髓損傷的鑒別。
　　脊髓組織的再生研究一直是創(chuàng)傷外科研究的前沿。在脊髓再生的研究中，對(duì)于脊髓損傷及修復(fù)的分子機(jī)制研究較多，尤其是對(duì)于脊髓的二次損傷，相關(guān)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑的研究如火如荼。微小RNA(英文全稱(chēng)為Micro-ribonucleic-acid，一般簡(jiǎn)稱(chēng)為MicroRNA或miRNA)是一類(lèi)大約由21－25個(gè)核苷酸組成的內(nèi)源性表達(dá)的單鏈非編碼小RNA，它通過(guò)抑制

6、靶信使RNA（英文全稱(chēng)為Messenger-ribonucleic-acid，一般簡(jiǎn)稱(chēng)為mRNA）翻譯或促使其降解的方式對(duì)基因表達(dá)起調(diào)控作用。眾多的相關(guān)分子中，microRNA-124在中樞神經(jīng)組織中表達(dá)的特異性，大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指向其作為闡釋脊髓損傷及其修復(fù)過(guò)程的關(guān)鍵一環(huán)。
　　目的：
　　本研究旨在通過(guò)收集急性創(chuàng)傷性脊髓損傷患者的相關(guān)臨床數(shù)據(jù)及外周血中的相關(guān)分子檢測(cè)，探討微小RNA-124在急性創(chuàng)傷性脊髓損傷診治中的應(yīng)用。

7、
　　方法：
　　選擇2014年9月至2015年9月在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診入院且資料完整的急性脊柱骨折的患者45例，按照脊髓損傷神經(jīng)學(xué)分類(lèi)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)中的美國(guó)脊髓損傷協(xié)會(huì)殘損分級(jí)（AIS分級(jí)）將患者分為脊髓完全性損傷組（AIS分級(jí)A級(jí)）15例，脊髓不完全性損傷組（AIS分級(jí)B、C、D級(jí)）15例，神經(jīng)功能正常組（AIS分級(jí)E級(jí)）15例，另選取同期入院的急性四肢骨折患者15例為對(duì)照組。抽取各組患者傷后24小時(shí)外周血并對(duì)其血漿mi

8、RNA-124水平及血清TNF-ɑ水平進(jìn)行測(cè)定。統(tǒng)計(jì)學(xué)采用SPSS21.0軟件分析數(shù)據(jù)，連續(xù)性變量均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(-x)±s）表示，定性資料的多組間比較采用χ2檢驗(yàn)；定量資料的多組間比較采用單因素方差分析。按照有無(wú)神經(jīng)損傷重新分組（完全損傷組+不完全損傷組vs神經(jīng)功能正常組+四肢骨折組），對(duì)外周血miR-124及TNF-ɑ兩指標(biāo)繪制受試者工作特征曲線(xiàn)（ROC），并計(jì)算曲線(xiàn)下面積（AUC）；以P<

9、0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、臨床資料
　　各組患者除入院體溫外，在年齡、性別、身高、體重等方面差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P>0.05)。
　　2、各組外周血miR-124的表達(dá)水平
　　完全損傷組、不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組、四肢骨折組患者外周血miR-124表達(dá)水平分別為（0.48±0.06）、（0.47±0.07）、（0.39±0.07）、（0.34±0.04），各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

10、F=27.28，P<0.01）。在多重比較中，完全損傷組與不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組與四肢骨折組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P>0.05）。完全損傷組、不完全損傷組的miR-124表達(dá)水平均高于其余兩組（均P<0.05）。
　　3、各組外周血TNF-ɑ的表達(dá)水平
　　完全損傷組、不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組、四肢骨折組患者外周血TNF-ɑ表達(dá)水平分別為（1.97±0.22）ng?ml-1、（1.85±0.43）ng?ml-1、（

11、1.78±0.21）ng?ml-1、（1.69±0.19）ng?ml-1。各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.51，P<0.05）。在多重比較中，完全損傷組與不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組與四肢骨折組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P>0.05）。完全損傷組、不完全損傷組的TNF-ɑ表達(dá)水平均高于其余兩組（均P<0.05）。
　　4、外周血miR-124與TNF-ɑ水平的ROC曲線(xiàn)分析
　　外周血miR-124與TNF-ɑ水平診斷脊髓損傷的

12、ROC曲線(xiàn)下面積分別為0．894（95％CI：0.828-0.961，P<0.01）及0.758（95%CI：0.651-0.865，P<0.01）。說(shuō)明外周血miR-124與TNF-ɑ水平均可指導(dǎo)診斷脊髓損傷，且miR-124較TNF-ɑ具有更大的臨床指導(dǎo)價(jià)值。
　　結(jié)論：
　　本研究表明，miRNA-124在急性脊髓損傷患者的外周血中特異性高表達(dá)，對(duì)早期診斷急性脊髓損傷有一定的應(yīng)用價(jià)值。
　　我們希望收集更多基層的