慢性應(yīng)激對(duì)大鼠認(rèn)知功能和海馬神經(jīng)細(xì)胞粘附分子表達(dá)的影響及氟西汀干預(yù)的研究.pdf

1、第一部分慢性束縛浸水應(yīng)激大鼠認(rèn)知功能改變及海馬區(qū)NCAM表達(dá)改變
　　 目的：
　　 探索慢性應(yīng)激對(duì)大鼠認(rèn)知功能及其海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞粘附分子表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 1.建立慢性應(yīng)激動(dòng)物模型
　　 選取成年Sprague dawley(SD)雄性大鼠60只,體重范圍在180-200g。隨機(jī)選取40只編號(hào)后作為應(yīng)激組,通過每日束縛浸水1小時(shí)的方式慢性應(yīng)激3周。剩余20只大鼠作為對(duì)照組自由攝食進(jìn)

2、水。
　　 2.Morris水迷宮試驗(yàn)測(cè)定大鼠認(rèn)知功能
　　 應(yīng)激3周完成后,選取應(yīng)激組及對(duì)照組大鼠各10只通過morris水迷宮試驗(yàn)進(jìn)行所有大鼠認(rèn)知記憶功能測(cè)定。通過記錄逃避潛伏期評(píng)價(jià)大鼠學(xué)習(xí)認(rèn)知功能。
　　 3.海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞粘附分子測(cè)定
　　 上述20只大鼠通過左心室多聚甲醛灌注后取大腦標(biāo)本,選取海馬區(qū)冰凍切片后,DAB免疫組化染色,采用LeicaL-D-2生物光學(xué)顯微鏡相連的LeicaDFC-30

3、0圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行NCAM定量分析。
　　 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS軟件進(jìn)行分析,數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果：
　　 1).大鼠因溺水、麻醉等意外死亡共4只,均為應(yīng)激組大鼠。2).20只應(yīng)激組及對(duì)照組逃避潛伏期:應(yīng)激組25.2±3.6s,對(duì)照組37.9±5.1s(p<0.05,t=-4.76)。3).應(yīng)激組海馬CA3區(qū)NCAM的表達(dá)25.2±3.6低于對(duì)照組37.9±5.1(P<0.05,

4、t=6.09)。
　　 結(jié)論：
　　 慢性應(yīng)激對(duì)于大鼠的認(rèn)知功能具有損害作用,慢性應(yīng)激大鼠的海馬區(qū)NCAM表達(dá)與正常對(duì)照大鼠相比呈下降趨勢(shì),表明慢性應(yīng)激會(huì)影響大鼠海馬區(qū)NCAM表達(dá),慢性束縛浸水可能通過某種機(jī)制抑制了大鼠NCAM表達(dá)從而損害了大鼠的認(rèn)知功能。
　　 第二部分氟西汀干預(yù)對(duì)于慢性應(yīng)激大鼠認(rèn)知功能及海馬NCAM的影響
　　 目的：
　　 探索氟西汀腹腔注射干預(yù)治療對(duì)于慢性應(yīng)激大鼠的認(rèn)知功

5、能及其海馬區(qū)NCAM表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 1.動(dòng)物分組
　　 將第一部分應(yīng)激組26只剩余大鼠隨機(jī)分為氟西汀干預(yù)組及生理鹽水應(yīng)激組,每組各13只。另對(duì)照組10只剩余大鼠自由攝食進(jìn)水。
　　 2.3周氟西汀干預(yù)
　　 氟西汀干預(yù)組給予劑量為10mg/kg的氟西汀腹腔注射干預(yù),生理鹽水組給予等量的生理鹽水腹腔注射對(duì)照,干預(yù)時(shí)間為3周,同時(shí)2組仍然保持每日1小時(shí)的束縛浸水應(yīng)激。另外10只剩余對(duì)

6、照組也給予同等量生理鹽水腹腔注射。
　　 3.Morris水迷宮試驗(yàn)測(cè)定大鼠認(rèn)知功能
　　 干預(yù)3周完成后,三組大鼠均通過morris水迷宮試驗(yàn)進(jìn)行所有大鼠認(rèn)知記憶功能測(cè)定。通過記錄逃避潛伏期評(píng)價(jià)大鼠學(xué)習(xí)認(rèn)知功能；
　　 4.海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞粘附分子測(cè)定
　　 完成水迷宮實(shí)驗(yàn)后大鼠通過左心室多聚甲醛灌注后取大腦標(biāo)本,冰凍切片后,選取海馬進(jìn)行DAB免疫組化染色,采用LeicaLD-2生物光學(xué)顯微鏡相連的Lei

7、caDFC-300圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行NCAM定量分析。
　　 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS11.0軟件進(jìn)行分析,數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗(yàn)及ANOVA檢驗(yàn)SNK法進(jìn)行兩兩比較。
　　 結(jié)果：
　　 1).氟西汀干預(yù)后水迷宮試驗(yàn)結(jié)果,逃避潛伏期:對(duì)照組(n=10)5.35±2.0s；氟西丁+應(yīng)激組(n=13)18.01±6.3s;應(yīng)激組+生理鹽水(n=13)54.18±23.08s；三組之間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2)

8、.氟西汀干預(yù)后NCAM測(cè)定結(jié)果為氟西汀干預(yù)組一只大鼠大腦標(biāo)本遺失。應(yīng)激組與干預(yù)組大鼠海馬CA3區(qū)NCAM的表達(dá)均低于對(duì)照組(P<0.05)應(yīng)激組大鼠的海馬CA3區(qū)NCAM的表達(dá)低于干預(yù)組,但差異無顯著性。對(duì)照組(n=10)38.6±2.57干預(yù)組(n=12)22.0±2.84應(yīng)激組(n=13)21.2±2.40。
　　 結(jié)論：
　　 SSRIs類藥物干預(yù)治療三周后可以改善慢性應(yīng)激引起的認(rèn)知功能損害現(xiàn)象,經(jīng)干預(yù)后大鼠的學(xué)習(xí)