脂肪干細胞旁分泌作用基于TGF-β1-Smads通路對增生性瘢痕影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究在旁分泌環(huán)境條件下，人脂肪干細胞（Adipose-derived stem cells,ADSCs）對增生性瘢痕(Hypertrophic Scar,HS）來源的成纖維細胞(Fibroblasts,Fbs）基于TGF-β1/Smads通路的影響，以及對增生性瘢痕中Ⅰ/Ⅲ型膠原沉積的影響。
　　方法：從人的脂肪組織中分離提取、培養(yǎng)脂肪干細胞；從增生性瘢痕患者手術(shù)切除的瘢痕組織中分離、培養(yǎng)增生性瘢痕來源的成纖維細胞；從正常人

2、皮膚分離培養(yǎng)正常皮膚來源的成纖維細胞。用Transwell小室建立ADSCs和HS來源的Fbs的共培養(yǎng)模型（實驗組），正常皮膚的Fbs單獨培養(yǎng)組和HS來源的Fbs單獨培養(yǎng)組作為對照組。比較三組Fbs在顯微鏡下的形態(tài)差異，不同的時間點（1-6day）CCK-8法檢測實驗組和對照組的細胞增殖的情況，Westernblot法檢測不同時間點實驗組和對照組細胞TGF-β1、P-Smad2/3、Smad7和Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白的表達情況。
　　結(jié)

3、果：
　?。?）經(jīng)Transwell小室共培養(yǎng)后的實驗組HS來源的Fbs增殖曲線低于單獨培養(yǎng)HS來源的Fbs，4d后差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），共培養(yǎng)后實驗組細胞的增殖曲線仍高于正常皮膚的Fbs單獨培養(yǎng)組，從3d開始差異縮小，5d時差異不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　?。?）共培養(yǎng)后實驗組細胞的TGF-β1、P-Smad2/3、Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白的表達低于HS來源的Fbs單獨培養(yǎng)組，差異具有統(tǒng)計學意義，實驗組細胞T