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1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文NFκB、PKC在內(nèi)毒素誘導(dǎo)肺巨噬細(xì)胞活化及凋亡中的作用和機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名:黎庶申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:汪正清2002.5.1的抑制率為452%(對(duì)NFKB)和738%(對(duì)NO),而PDTC的抑制率則為638%(對(duì)NF—KB)和806%(對(duì)NO),測(cè)值明顯低于LPS處理組(pO05001);②NF’KB的核內(nèi)移位(免疫組化):正常對(duì)照組細(xì)胞的NFKB主要位于胞漿中,僅少許細(xì)胞核內(nèi)有NFKB的存
2、在;LPS處理后NFKB由胞漿中轉(zhuǎn)移到核內(nèi);對(duì)CalC和PDTC阻斷組的細(xì)胞而言,NFKB位于核內(nèi)或胞漿的細(xì)胞混雜存在,且后者細(xì)胞片中NFKB位于胞漿的細(xì)胞比例較前者為多,但都明顯少于正常對(duì)照組;③細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變:?jiǎn)斡肔PS作用后細(xì)胞發(fā)生凋亡表現(xiàn)為細(xì)胞變圓,胞漿濃縮甚至消失,核染色質(zhì)邊聚,呈半月形,核仁裂解,出現(xiàn)凋亡小體。隨LPS作用時(shí)間延長(zhǎng),凋亡小體增多,甚至出現(xiàn)細(xì)胞死亡,溶解。CalC和PDTc預(yù)處理均能減少LPS作用引起的細(xì)
3、胞凋亡的發(fā)生數(shù)量;④凋亡電泳:在LPS作用組,細(xì)胞基因組DNA提取物的電泳泳道中可清晰看到特征性凋亡電泳圖譜,呈現(xiàn)梯狀DNA電泳條帶,間距約在200bp左右(也稱Ladderpatcem現(xiàn)象),CalC阻斷組能觀察到微弱的梯狀DNA電泳條帶,但與LPS作用組相比明顯減弱。正常對(duì)照組和PDTC阻斷組幾乎不見(jiàn)凋亡電泳圖譜。結(jié)論:1LPS能誘導(dǎo)肺巨噬細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子NFKB的激活,進(jìn)而引起NOS等基因轉(zhuǎn)錄與表達(dá)增加,最終導(dǎo)致巨噬細(xì)胞凋亡。2特異
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