粉紅膠霉菌對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠早期腎損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：糖尿病腎病(diadetic nephropathy， DN)在我國(guó)繼發(fā)性腎小球病中占有重要地位，隨著糖尿病(diabetes mellitus，DM)患病率的增加，DN的患病率也呈增加趨勢(shì)，且已經(jīng)成為終末期腎衰竭(ESRF)的主要病因。目前尚無針對(duì)DN的特效治療，除了嚴(yán)格控制血糖，合理應(yīng)用ACEI和ARB類藥物，適當(dāng)限制蛋白和鈉的攝入外，中醫(yī)及中西醫(yī)結(jié)合治療本病也取得了一定進(jìn)展。隨著對(duì)細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的研究，發(fā)現(xiàn)DN起病時(shí)

2、存在炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)，細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)水平的上升，隨后導(dǎo)致腎小球內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)異常聚集和腎小球硬化，目前研究認(rèn)為TGF-β1是腎小球硬化形成過程中重要的細(xì)胞因子之一。近年來冬蟲夏草治療腎臟病引起了學(xué)者們的廣泛關(guān)注，它具有改善細(xì)胞代謝，調(diào)節(jié)脂代謝，抗氧化應(yīng)激及抗纖維化的作用，在控制癥狀，改善客觀指標(biāo)及遠(yuǎn)期療效方面具有一定的優(yōu)勢(shì)，治療前景廣闊。
　　 本實(shí)驗(yàn)以鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠為模型，用

3、人工蟲草菌絲制劑粉紅膠霉菌進(jìn)行為期8周的干預(yù)性實(shí)驗(yàn)，并且設(shè)置聯(lián)合ACEI類藥物用藥組，觀察糖尿病大鼠的各項(xiàng)指標(biāo)及腎組織中細(xì)胞因子表達(dá)的變化，探討粉紅膠霉菌對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠早期腎損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。方法將40只正常雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組(N)8只，糖尿病模型組(M)8只，粉紅膠霉菌治療組(G)8只，貝那普利組(B)8只，粉紅膠霉菌聯(lián)合貝那普利治療組(GB)8只，其中M組、G組、B組和GB組應(yīng)用鏈尿佐菌素(STZ)

4、65mg/kg腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，G組成模后給予粉紅膠霉菌0.5g/kg/d灌胃，B組給予貝那普利4mg/kg/d灌胃，GB組給予粉紅膠霉菌0.5g/kg/d、貝那普利4mg/kg/d聯(lián)合灌胃，M組與N組給予等量生理鹽水灌胃，8周后觀察24h尿蛋白、血尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)水平，每4周末監(jiān)測(cè)血糖，同時(shí)行HE，PAS和MASSON染色觀察腎臟病理變化，采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法檢測(cè)腎臟TGF-β1，TIMP-1及PA

5、I-1mRNA的表達(dá)，用免疫組化法檢測(cè)TGF-β1，LN，ColIV的表達(dá)。
　　 結(jié)果(1)M組、G組、B組和GB組血肌酐，尿素氮水平及24h尿蛋白定量明顯高于N組(P＜0.01)，M組上述指標(biāo)顯著升高，與G組、B組、GB組比較有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.01)，GB組上述指標(biāo)明顯低于其他各組(P＜0.05)。除N組外，其他各組血糖比較無統(tǒng)計(jì)意義(P＞0.05)。
　　 (2)腎組織病理檢查N組無明顯異常，M組出現(xiàn)腎小球肥大，

6、腎小球內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)蓄積，基底膜增厚，系膜細(xì)胞增生指標(biāo)明顯高于N組(P＜0.01)，G組、B組與GB組病變輕于M組(P＜0.01)，GB組病變輕于G組和B組(P＜0.05)，G組與B組病理改變無明顯差別(P＞0.05)。
　　 (3)G組、B組和GB組TGF-β1，TIMP-1及PAI-1 mRNA的表達(dá)均明顯低于M組，但高于N組(P＜0.01)。TGF-β1和TIMP-lmRNA在GB組中的表達(dá)低于G組和B組(P＜0.01)，G

7、組與B組之間無明顯差別(P＞0.05)。PAI-1 mRNA在GB組中的表達(dá)明顯低于M組及B組(P＜0.05)，但與G組比較無明顯差別(P＞0.05)。
　　 (4)腎組織中TGF-β1、LN和ColIV表達(dá)在G組、B組和GB組均有下調(diào)(P＜0.01)，GB組與G組、B組比較也有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論粉紅膠霉菌可以明顯減少大鼠的24h尿蛋白排泄量，降低血清Scr，BUN水平，下調(diào)腎組織中TGF-β1、TI