不同冷缺血時間對中度脂肪變性肝臟移植影響的實(shí)驗研究.pdf

1、第一章大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立和評價
　　目的:高脂飼料配方誘導(dǎo)大鼠肝臟脂肪變性方法
　　方法:采用高脂飼料喂養(yǎng)SD大鼠，病理觀察肝臟脂肪變性程度。同普通飼料喂養(yǎng)組大鼠對比，檢測谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate Aminotransferase，AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AlanineAminotransfera-se，ALT)、甘油三脂(Triglyceride，TG)變化情況。
　　結(jié)果:高脂喂養(yǎng)3周(HF1組)、6

2、周(HF2組)、9周(HF3組)，大鼠肝臟分別呈輕度、中度、重度脂肪變，對照組3周(LF1組)、6周(LF2組)、9周(LF3組)未見脂肪變性。HF1組和LF1組AST和ALT無統(tǒng)計學(xué)差異，HF2組和LF2組、HF3組和LF3組組間比較，HF組AST和ALT高于LF(P＜0.05);HF各組比LF組的TG含量顯著升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:高脂誘導(dǎo)成功建立大鼠脂肪變肝臟模型，方法簡單經(jīng)濟(jì)。
　　第二章大鼠中度變性脂肪肝

3、移植模型
　　目的:建立中度脂肪變供肝肝移植模型
　　方法:雄性SD大鼠高脂飼料飼養(yǎng)6周，在Kammada法基礎(chǔ)上，改良操作方法，建立脂肪變性供肝移植模型?？偨Y(jié)手術(shù)操作數(shù)據(jù)，分別在術(shù)前1天、術(shù)后1天、3天、5天、7天，觀察ALT的變化規(guī)律。
　　結(jié)果:預(yù)實(shí)驗操作60對，24h小時內(nèi)死亡的主要原因包括靜脈套管滑脫、扭曲、下腔靜脈急性出血，24h后大鼠死亡主要為肝功能障礙、肝上下腔滲血、膽管堵塞;正式實(shí)驗40對大鼠，其中1

4、周生存率90％(37/40)。3只大鼠移植后1周內(nèi)死亡，分別為下腔靜脈出血、膽管阻塞、移植物衰竭。供體手術(shù)時間:50±4min，熱缺血時間（心臟停跳至灌注開始）:0mim;冷缺血時間:40±3min;受體總時間:55±5min，無肝期:16±2.5min。ALT術(shù)后開始升高，3d達(dá)到峰值，7d基本降至正常水平。
　　結(jié)論:成功建立中度脂肪變供肝肝大鼠移植模型。
　　第三章不同冷缺血時間對中度脂肪變性肝臟移植后肝臟功能影響的實(shí)

5、驗研究
　　目的:探索中度脂肪變性供肝冷保存時間極限，研究大鼠脂肪肝靜態(tài)冷保存時間對缺血再灌住的影響及其機(jī)制
　　方法:方案一:中度脂肪肝分別冷保存8h(CI8h)，12h(CI2h)，16h(CI16h)，按中度脂肪變供肝肝移植模型進(jìn)行手術(shù)，比較大鼠各組生存情況。方案二:中度脂肪肝分別冷保存1h(CI1h)，4h(CI4h)，8h(CI8h)，同樣按脂肪變供肝肝移植模型手術(shù)，分別在術(shù)前1天、術(shù)后1天、3天、5天、7天，檢測

6、評估AST、ALT、IL-6、TNF-a變化規(guī)律。Suzuki標(biāo)準(zhǔn)評價移植后組織損傷。TUNEL檢測肝組織凋亡情況。
　　結(jié)果:CI8h組、CI2h組、CI16h組移植術(shù)后7d生存情況分別為55.6％(5/9)、33.4％(5/9)、11.1％(5/9)。CI1h組、CI4h組、CI8h組移植后各組術(shù)后6h AST和ALT開始升高，3d達(dá)到峰值，分別為700.1±76.6U/L和593.3±43.5U/L，1294.2±165.1

7、U/L和1046.6±62.2U/L，1446.2±227.6U/L和1206.2±53.5U/L，組間比較存在顯著差異(P＜0.05)。CI1h組、CI4h組、CI8h組術(shù)后IL-6和TNF-a術(shù)后1d達(dá)到峰值，分別為682.0±41.6pg/ml和348.0±60.1pg/ml，954.3±64.4pg/ml和416.8±55.6pg/ml，1315.9±54.9pg/ml和514.7±71.7pg/ml，組間比較存在顯著差異(P＜