冷應(yīng)激對雞肝臟脂肪代謝與炎性因子的影響.pdf

1、寒冷是北方地區(qū)動物面臨的主要應(yīng)激源，研究表明寒冷地區(qū)冷應(yīng)激可直接影響畜禽的健康及福利。低溫可以增加家禽血清中游離脂肪酸、尿酸水平，降低血糖水平、脂質(zhì)代謝增強(qiáng)。免疫反應(yīng)和代謝調(diào)節(jié)高度統(tǒng)一，功能上相互依賴。冷應(yīng)激后機(jī)體大量的能量被用于分解代謝，而保障供給免疫和炎癥的活化的能量減少，使機(jī)體產(chǎn)生代謝性炎癥。本實(shí)驗(yàn)探討了冷應(yīng)激對雞肝臟脂質(zhì)代謝和炎性因子的影響，應(yīng)用基因克隆技術(shù)在原核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)了PPARα和AMPKα并制備了多克隆抗體，以雛雞為

2、研究對象，進(jìn)行急、慢性冷應(yīng)激(12±1℃)處理，檢測了血清生化指標(biāo)、肝臟脂聯(lián)素、PPARα、AMPKα等脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)及含量、肝臟炎癥相關(guān)基因表達(dá)及含量、肝臟熱休克蛋白基因表達(dá)。結(jié)果表明：
　　 1.利用原核表達(dá)載體表達(dá)PPARα和AMPKα融合蛋白免疫新西蘭白兔，成功制備了兔抗雞PPARα和AMPKα多克隆抗體。
　　 2.急、慢性冷應(yīng)激可引起雞血清FFA、TG、GHO、LDL、HDL含量和ALT活性改變，提示冷

3、應(yīng)激能夠使機(jī)體脂質(zhì)代謝增加，為機(jī)體提供能量供應(yīng)；還表明冷應(yīng)激可引起肝臟的損傷。
　　 3.急、慢性冷應(yīng)激可引起雞肝臟脂聯(lián)素、AdipoR1和AdipoR2含量以及mRNA表達(dá)量增加，提示冷應(yīng)激可能通過脂聯(lián)素途徑增加機(jī)體脂質(zhì)代謝。
　　 4.急、慢性冷應(yīng)激時，雞肝臟PPARα、AMPKα蛋白表達(dá)增加，肝臟AMPKα1、AMPKα2、CPT1、ACAO含量增加，肝臟ACC、丙二酰輔酶A含量降低，肝臟PPARα、LXRα、AM

4、PKα1、AMPKα2、CPT1 mRNA表達(dá)增加，肝臟ACC mRNA表達(dá)降低，提示冷應(yīng)激可能通過脂聯(lián)素-PPARα-AMPKα途徑增加機(jī)體脂質(zhì)代謝。
　　 5.急、慢性冷應(yīng)激時，雞肝臟炎性基因PGE synthase、Cox-2、NF-kB蛋白表達(dá)增加，肝臟PGE synthase、Cox-2、NF-kB、TNFα、iNOS、HO-1 mRNA表達(dá)增加，提示這些基因的表達(dá)可能參與了冷應(yīng)激致雞肝臟炎癥的過程。
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5、.急、慢性冷應(yīng)激時，雞肝臟HSP70、GRP78蛋白及mRNA表達(dá)量升高，并首次證實(shí)，急、慢性冷應(yīng)激可引起雞肝臟HSP60、HSP90 mRNA表達(dá)增加。提示機(jī)體可以通過HSP途徑抵抗冷應(yīng)激致雞肝臟的損傷。
　　 綜上所述，冷應(yīng)激可通過脂聯(lián)素-PPARα-AMPKα途徑調(diào)節(jié)雞肝臟脂質(zhì)代謝，并引起ALT活性增加，伴有肝臟PGE synthase、Cox-2、NF-kB、TNFα、iNOS、HO-1)和HSP70、GRP78、HSP