碳水化合物反應元件結合蛋白及其靶基因在非酒精性脂肪肝發(fā)病機制中的作用.pdf

1、目的：
　　 以高糖飲食構建大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型,通過對不同時間點大鼠肝組織中ChREBP及其靶基因ACC、FAS的mRNA表達和蛋白水平,ChREBP與ACC、FAS基因啟動子碳水化合物應答元件(ChRE)結合情況的檢測,以探討ChREBP及其靶基因ACC、FAS在高糖大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)發(fā)病機制中的作用。
　　 方法：
　　 選取SD大鼠32只,隨機分為對照組和高糖組。高糖組于4、

2、8、12周末處死,對照組于12周末處死。每組在處死前禁食12小時后腹主動脈采血檢測甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST),HE染色觀察肝臟脂肪變性,RT-PCR和Western blot方法測定不同時間點大鼠肝臟組織中ChREBP、ACC、Fan的mRNA表達和蛋白水平,染色質免疫共沉淀的方法分析不同時間點ChREBP與ACC、FAS基因啟動子碳水化合物應答元件(ChRE)結合情況。
　　

3、 結果：
　　 成功構建高糖飲食大鼠NAFLD模型,隨著造模時間的延長,血清生化(TG、、TC、ALT、AST)指標顯著升高(P＜0.01),肝脂肪程度不斷加重,第4、8和12周末高糖組大鼠肝組織ChREBP、ACC、FanmRNA、蛋白及ChREDNA的表達水平,與對照組差異顯著(P＜0.01),且隨造模時間延長,其表達量顯著增加。
　　 結論：
　　 高碳水化合物飲食可增強ChREBP的表達,而ChREBP通