枸杞總多糖對2型糖尿病大鼠的降糖作用及免疫系統(tǒng)相關因子的影響.pdf

1、糖尿病是由遺傳和環(huán)境因素相互作用引起的一種內(nèi)分泌代謝紊亂綜合癥，在世界范圍內(nèi)已成為繼心腦血管疾病、癌癥之后危害人類健康的第三大疾病，其中85％～95％為2型糖尿病。2型糖尿病主要以糖脂代謝紊亂、血糖升高、胰島細胞損傷和胰島素分泌不足等為主要特征，有研究證實，糖尿病病人可出現(xiàn)免疫功能的紊亂。目前，環(huán)孢菌素、硫唑嘌呤、胸腺肽、白蛋白和免疫球蛋白等用于2型糖尿病免疫治療有嚴重的副作用，且大多不能從根本上改善機體的免疫功能。因此，近年來國內(nèi)外研

2、究者從天然植物中篩選具有降糖和免疫調(diào)節(jié)作用的植物多糖。枸杞多糖是傳統(tǒng)中藥枸杞子的主要活性組分，是一種非特異免疫增強劑，現(xiàn)代藥理學研究表明其具有降血糖、降血脂、調(diào)節(jié)機體免疫及抗氧化等多種生物學活性，具有良好的藥用開發(fā)價值。本研究擬從寧夏枸杞中提取純化枸杞總多糖，闡明枸杞總多糖對2型糖尿病大鼠的降糖作用及免疫功能的影響，旨在為綜合開發(fā)利用枸杞總多糖應用于2型糖尿病的臨床防治提供理論依據(jù)。
　　 第一部分
　　 枸杞總多糖的提

3、取純化。
　　 目的:從寧夏枸杞中提取純化枸杞總多糖。
　　 方法:利用水提醇沉法從寧夏枸杞中提取水溶性多糖，采用D101大孔樹脂層析柱對粗多糖進行純化，應用苯酚-硫酸法對多糖含量進行測定，并通過正交實驗對多糖的提取條件進行優(yōu)化。
　　 結(jié)果:經(jīng)優(yōu)化后的枸杞總多糖提取工藝為:枸杞經(jīng)烘干后，于80℃經(jīng)石油醚回留脫脂3h，80℃水提多糖4次，每次30 min，枸杞∶水量=1∶8，醇沉乙醇的含量為80％，三氯乙酸用量為

4、溶液終體積的1％。此條件下的枸杞多糖的提取率為5.27％，含量為24.2％。
　　 小結(jié):枸杞總多糖得率和純度均較好，適用于藥理學實驗。
　　 第二部分
　　 枸杞總多糖的降糖作用研究。
　　 目的:探討枸杞總多糖對2型糖尿病大鼠的降血糖作用。
　　 方法:采用高脂高糖飲食聯(lián)合小劑量注射STZ的方法制備2型糖尿病大鼠模型。選取糖尿病模型大鼠40只，隨機均分為5組:模型組，枸杞總多糖低劑量(100

5、mg/kg)、中劑量(200 mg/kg)和高劑量(400 mg/kg)干預組，格列苯脲干預組（陽性藥物組）;另取8只大鼠作為正常對照組。
　　 通過酶比色法、放射免疫分析法、ELISA等方法測定枸杞總多糖對2型糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)水平、空腹胰島素(FINS)水平、C-肽(C-P)水平、糖化血紅蛋白(HbA1c)含量的影響，通過光鏡和電鏡分別觀察枸杞總多糖對2型糖尿病大鼠胰島和肝臟的組織結(jié)構影響;采用免疫組化法檢測枸杞總

6、多糖對2型糖尿病大鼠胰島素分泌的影響。
　　 結(jié)果:糖尿病模型組大鼠的FBG水平顯著高于正常對照組大鼠（P＜0.005)，F(xiàn)INS、C-P和HbA1c水平則顯著低于正常對照組大鼠（P＜0.005)。以不同劑量的枸杞總多糖干預治療糖尿病模型組4周后，各治療組糖尿病大鼠的FBG水平顯著降低（P＜0.005)，F(xiàn)INS、C-P和HbA1c水平則顯著升高（P＜0.005)，且呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。此外，糖尿病對照組大鼠的胰腺和肝臟組織

7、呈現(xiàn)明顯的病理學形態(tài)，胰島萎縮，胰島細胞減少，肝臟組織脂質(zhì)積累嚴重。經(jīng)枸杞總多糖干預治療后，糖尿病大鼠的胰腺組織病理形態(tài)和肝臟脂肪變性明顯改善，胰島細胞胰島素分泌增多。
　　 小結(jié):枸杞總多糖可有效控制2型糖尿病模型大鼠的空腹血糖水平，調(diào)節(jié)糖代謝，減輕糖尿病模型大鼠胰島β細胞損傷，促進胰島β細胞分泌胰島素，改善肝臟脂質(zhì)代謝。枸杞總多糖對2型糖尿病模型大鼠的治療作用呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。
　　 第三部分
　　 枸

8、杞總多糖對2型糖尿病大鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。
　　 目的:探討枸杞總多糖對2型糖尿病大鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。
　　 方法:動物造模和分組及給藥方法同前，采用western bolts法檢測枸杞總多糖對2型糖尿病模型組大鼠脾臟組織中細胞因子白細胞介素-1 IL-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達的影響。
　　 結(jié)果:Western bolts結(jié)果表明，與正常對照組比，

9、糖尿病模型組大鼠脾臟組織中白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達均明顯升高;以不同劑量的枸杞總多糖干預治療糖尿病模型組大鼠4周后，各治療組糖尿病模型大鼠脾臟組織中白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達均顯著降低（P＜0.05）。
　　 小結(jié):枸杞總多糖可有效抑制2型糖尿病大鼠脾臟組織中白細胞介素-1β(IL-1β、