肝X受體激動(dòng)劑T0901317對(duì)糖尿病心肌病大鼠心肌細(xì)胞炎癥及凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　1、在動(dòng)物模型上驗(yàn)證肝X受體過(guò)表達(dá)可改善糖尿病心肌細(xì)胞炎癥及凋亡；
　　2、在動(dòng)物模型上驗(yàn)證肝 X受體通過(guò)抑制 NF-κB的活性改善心肌細(xì)胞炎癥及凋亡。
　　方法：
　　1.采用雄性4周齡wistar大鼠為研究對(duì)象，實(shí)驗(yàn)分為：正常大鼠+生理鹽水組、正常大鼠+DMSO組、糖尿病心肌病大鼠+DMSO組、糖尿病心肌病大鼠+T0901317+DMSO組、糖尿病心肌病+生理鹽水、正常大鼠+T0901317+DM

2、SO組。正常大鼠給予常規(guī)飲食水，糖尿病大鼠給予高糖、高脂飲食，4周末腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）構(gòu)建糖尿病心肌病模型。
　　2. HE染色檢測(cè)wistar大鼠心肌膠原蛋白變化，透射電鏡觀(guān)察大鼠心肌組織超微結(jié)構(gòu)改變、EMSA檢測(cè)LXRs活性，EMSA檢測(cè)NF-κB的活性、ELISA檢測(cè)心肌細(xì)胞炎癥因子TNF-α、IL-6的基因表達(dá)、western blot檢測(cè)caspase-3蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.HE染色觀(guān)察

3、大鼠心肌細(xì)胞膠原蛋白變化結(jié)果：正常大鼠心肌纖維排列規(guī)整，排列成束；糖尿病心肌病大鼠可見(jiàn)纖維組織增生，心肌纖維排列紊亂；糖尿病心肌病+T0901317+DMSO組大鼠可見(jiàn)纖維組織增生，但肌纖維排列尚規(guī)整。
　　2.心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變：正常大鼠電鏡可見(jiàn)心肌纖維規(guī)則，由閏盤(pán)相連接，閏盤(pán)清晰，成一條直線(xiàn)，結(jié)構(gòu)完整，線(xiàn)粒體成行排列，形態(tài)正常；與正常大鼠相比，糖尿病心肌病大鼠心肌纖維走行紊亂，心肌間質(zhì)膠原纖維增生明顯，閏盤(pán)扭曲、模糊不清，可

4、見(jiàn)部分心肌纖維閏盤(pán)破壞，線(xiàn)粒體排列紊亂，局部可見(jiàn)線(xiàn)粒體增生、腫脹，部分線(xiàn)粒體嵴斷裂，膜破損；與糖尿病心肌病組+生理鹽水及糖尿病心肌病+DMSO相比，糖尿病心肌病+T0901317+DMSO組大鼠心肌纖維排列尚規(guī)則，纖維化較輕，閏盤(pán)模糊不清，但結(jié)構(gòu)完整，線(xiàn)粒體排列規(guī)整，可見(jiàn)部分線(xiàn)粒體畸形及腫脹。
　　3.EMSA檢測(cè)肝X受體活性結(jié)果：與正常大鼠相比，糖尿病心肌病大鼠心肌細(xì)胞肝X受體活性減低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0.05）；與糖尿

5、病心肌病大鼠+DMSO組相比，糖尿病心肌病大鼠+T0901317+DMSO組心肌細(xì)胞肝 X受體活性明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0.05）；與糖尿病心肌病+生理鹽水組相比，糖尿病心肌病大鼠+DMSO組心肌細(xì)胞肝X受體活性無(wú)差異（P>0.05）；與正常大鼠+T0901317+DMSO組相比，糖尿病心肌病病大鼠+T0901317+DMSO組心肌細(xì)胞肝X受體活性無(wú)差異（ P＞0.05）。
　　4.EMSA檢測(cè)NF-κB活性結(jié)果：與正

6、常大鼠相比，糖尿病心肌病大鼠心肌細(xì)胞NF-kB活性明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0.05）；與糖尿病心肌病組+生理鹽水及糖尿病心肌病+DMSO組相比，糖尿病心肌病+T0901317+DMSO組大鼠心肌細(xì)胞 NF-κB活性明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0.05）；與糖尿病心肌病+生理鹽水組相比，糖尿病心肌病大鼠+DMSO組心肌細(xì)胞NF-κB活性無(wú)差異（P>0.05）；與正常大鼠+T0901317+DMSO組相比，糖尿病心肌病大鼠+

7、T0901317+DMSO組心肌細(xì)胞 NF-κB活性增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0.05）。
　　5.ELISA檢測(cè)心肌細(xì)胞炎癥因子TNF-α、IL-6的基因表達(dá)結(jié)果：與正常大鼠相比，糖尿病心肌病大鼠炎癥因子 TNF-α、IL-6基因表達(dá)明顯增高（ P＜0.05）；與糖尿病心肌病組+生理鹽水及糖尿病心肌病+DMSO組相比，糖尿病心肌病大鼠+T0901317+DMSO組心肌細(xì)胞炎癥因子TNF-α、IL-6基因表達(dá)下降（ P＜0.0

8、5）；與糖尿病心肌病+生理鹽水組相比，糖尿病心肌病大鼠+DMSO組心肌細(xì)胞炎癥因子 TNF-α、IL-6基因表達(dá)無(wú)差異（ P>0.05）；與正常大鼠+T0901317+DMSO組相比，糖尿病心肌病大鼠+T0901317+DMSO組炎癥因子TNF-α、IL-6基因表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0.05）。
　　6.Western Blot檢測(cè)Caspase-3蛋白結(jié)果：與正常大鼠相比，糖尿病心肌病大鼠 Caspase-3蛋白表達(dá)

9、明顯增高（ P＜0.05）；與糖尿病心肌病組+生理鹽水及糖尿病心肌病+DMSO組相比，糖尿病心肌病+T0901317+DMSO組心肌細(xì)胞caspase-3蛋白表達(dá)降低（ P＜0.05）；與糖尿病心肌病+生理鹽水組相比，糖尿病心肌病大鼠+DMSO組心肌細(xì)胞C a s p a s e-3蛋白表達(dá)無(wú)差異（P>0.05）；與正常大鼠+T0901317+DMSO組相比，糖尿病心肌病大鼠+T0901317+DMSO組Caspase-3蛋白表達(dá)升高，